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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » pPICZαA到底能不能用EcoRI 单酶切呢？
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ggyy0911

铁虫 (正式写手)

[求助] pPICZαA到底能不能用EcoRI 单酶切呢？ 已有1人参与

EcoRI酶切位点和前面的KEX2有碱基重叠，不知道如果选这个单酶切位点做单酶切连接目的片段，会不会影响基因表达。
  如图，求高手分析一下。这样的话，EcoRI还能做单酶切连目的片段么？
  这个载体上我唯一能用的就是EcoRI和Xbal，用Xbal还得换宿主菌，现在实验室只有DH5a，甲基化菌，用了就怕Xbal切不开。

pPICZαA到底能不能用EcoRI 单酶切呢？
pPICZa序列.png


pPICZαA到底能不能用EcoRI 单酶切呢？-1
pPICZalphaA载体图谱.gif
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1楼 2014-11-12 21:31:16
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董博士

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
ggyy0911(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-15 14:53:34
可以的，因为你的目的片段上也会加上EcoR 1的酶切位点，连接酶连接后这里还是和原载体上的一样，不会影响目的基因的表达的。
赞一下 回复此楼
医学&统计学
2楼2014-11-14 11:48:13
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ggyy0911

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 董博士 at 2014-11-14 11:48:13
可以的，因为你的目的片段上也会加上EcoR 1的酶切位点，连接酶连接后这里还是和原载体上的一样，不会影响目的基因的表达的。

等了好多天，终于有人回我了～非常感谢！

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2014-11-15 21:30:01
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