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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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ggyy0911

铁虫 (正式写手)

[求助] pPICZαA到底能不能用EcoRI 单酶切呢? 已有1人参与

EcoRI酶切位点和前面的KEX2有碱基重叠,不知道如果选这个单酶切位点做单酶切连接目的片段,会不会影响基因表达。
  如图,求高手分析一下。这样的话,EcoRI还能做单酶切连目的片段么?
  这个载体上我唯一能用的就是EcoRI和Xbal,用Xbal还得换宿主菌,现在实验室只有DH5a,甲基化菌,用了就怕Xbal切不开。

pPICZαA到底能不能用EcoRI 单酶切呢?
pPICZa序列.png


pPICZαA到底能不能用EcoRI 单酶切呢?-1
pPICZalphaA载体图谱.gif
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董博士

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
ggyy0911(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-15 14:53:34
可以的,因为你的目的片段上也会加上EcoR 1的酶切位点,连接酶连接后这里还是和原载体上的一样,不会影响目的基因的表达的。
医学&统计学
2楼2014-11-14 11:48:13
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ggyy0911

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 董博士 at 2014-11-14 11:48:13
可以的,因为你的目的片段上也会加上EcoR 1的酶切位点,连接酶连接后这里还是和原载体上的一样,不会影响目的基因的表达的。

等了好多天,终于有人回我了~非常感谢!

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-11-15 21:30:01
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