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zxcao_y

金虫 (小有名气)

[交流] 介孔材料固定酶 需要作高分辨透射电镜吗?能做HRTEM吗?

介孔材料固定酶 需要作高分辨透射电镜吗?能不能做HRTEM?

请达人 多多指!!
  介孔材料固定酶之后,想要判断酶的位置是不是必须要作高分辨电镜?
  我查的文献一般都是只作单独的介孔材料的HRTEM,而没见固定酶之后的介孔材料的 HRTEM.  心中一支疑惑,是不是这个表征手段不适合判断酶的位置? HRTEM做不了(会破坏酶吗)? 还是其他的什么原因(文献没查全,也有文章这样表征的)?

如果能做,是不是制样的时候需要注意一些东西?
Help me! 这个问题折磨的我要发疯了 。不懂~~~~
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titania

铁杆木虫 (小有名气)

这么强的电子束打过去,酶还能保留?难道不应该是灰飞云灭了?
个人观点
2楼2008-05-09 23:14:33
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temedx

专家顾问 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
3040821025(金币+10,VIP+0):楼主给的金币
没必要作TEM,因为酶是有机物,高分辨TEM的电压一般是200kV,很容易被打坏,另外,有机物在厚的孔材料里面很难看出明显的衬度,无法得到高质量的照片。
如果做TEM看孔结构保持完整,还是可以看看,但要看酶的位置,还是免了。
Everybodyissobusymindingotherppl'sbusiness,thattheyforgettofindtheirownhappiness.
3楼2008-05-10 09:05:28
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zxcao_y

金虫 (小有名气)

谢谢。

怎么给金币我还不会,请斑竹帮忙代给楼上的二位吧。
4楼2008-05-11 14:35:22
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hand1980

可以试试超薄切片制样也许能看到酶的位置,高分辨肯定不行了,找个100KV的生物电镜试试
5楼2008-05-12 08:38:14
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kuku5837135

银虫 (正式写手)

建议做cyro-TEM ,液氮冷冻下做
6楼2008-05-12 10:05:47
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dengwenjing456

铜虫 (小有名气)

作一下红外光谱应该可以看出来酶到低固定上去没有.
7楼2008-05-12 21:08:57
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limour

新虫 (小有名气)

titan can do HRTEM for carbon sample with 50KV. I think qinghua has one.

however, i dont think any valuable information could be obtainbed by using TEM for non-crystalline samples, especially bio samples.

maybe you can use SEM
8楼2008-05-21 15:42:13
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