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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 微米和纳米 » 学术讨论 » 介孔材料固定酶 需要作高分辨透射电镜吗？能做HRTEM吗?
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zxcao_y

金虫 (小有名气)

[交流] 介孔材料固定酶 需要作高分辨透射电镜吗？能做HRTEM吗?

介孔材料固定酶 需要作高分辨透射电镜吗？能不能做HRTEM?

请达人 多多指！！
  介孔材料固定酶之后，想要判断酶的位置是不是必须要作高分辨电镜？
  我查的文献一般都是只作单独的介孔材料的HRTEM,而没见固定酶之后的介孔材料的 HRTEM.  心中一支疑惑，是不是这个表征手段不适合判断酶的位置？ HRTEM做不了（会破坏酶吗）？ 还是其他的什么原因（文献没查全，也有文章这样表征的）？

如果能做，是不是制样的时候需要注意一些东西？
Help me! 这个问题折磨的我要发疯了 。不懂～～～～
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1楼 2008-05-09 21:41:32
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titania

铁杆木虫 (小有名气)
这么强的电子束打过去，酶还能保留？难道不应该是灰飞云灭了？
个人观点
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2楼2008-05-09 23:14:33
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temedx

专家顾问 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
3040821025(金币+10,VIP+0):楼主给的金币
没必要作TEM，因为酶是有机物，高分辨TEM的电压一般是200kV，很容易被打坏，另外，有机物在厚的孔材料里面很难看出明显的衬度，无法得到高质量的照片。
如果做TEM看孔结构保持完整，还是可以看看，但要看酶的位置，还是免了。
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Everybodyissobusymindingotherppl'sbusiness,thattheyforgettofindtheirownhappiness.
3楼2008-05-10 09:05:28
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zxcao_y

金虫 (小有名气)

谢谢。

怎么给金币我还不会，请斑竹帮忙代给楼上的二位吧。
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4楼2008-05-11 14:35:22
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hand1980

可以试试超薄切片制样也许能看到酶的位置,高分辨肯定不行了,找个100KV的生物电镜试试
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5楼2008-05-12 08:38:14
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kuku5837135

银虫 (正式写手)
建议做cyro-TEM ，液氮冷冻下做
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6楼2008-05-12 10:05:47
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dengwenjing456

铜虫 (小有名气)
作一下红外光谱应该可以看出来酶到低固定上去没有.
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7楼2008-05-12 21:08:57
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limour

新虫 (小有名气)
titan can do HRTEM for carbon sample with 50KV. I think qinghua has one.

however, i dont think any valuable information could be obtainbed by using TEM for non-crystalline samples, especially bio samples.

maybe you can use SEM
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8楼2008-05-21 15:42:13
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