应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PCR 一般常识 中的疑问
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
81/1返回列表
查看: 636  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

wedyy0610

木虫 (职业作家)

老小孩

[交流] PCR 一般常识 中的疑问

各位分子高手，我对于分子这方面的知识懂的很少，有几个问题向问问大家，我先谢谢各位老师了
1.关于PCR程序问题
94度 5：00
94度 1：00
引物54度 0：45
72度 0：45
goto step2 35循环
72度 10：00
不明白为红色标记，为什么是这个温度 或者为什么设定这个时间？
2.半定量——PCR 的英文缩写是什么 ?
意义是什么？
3.关于PCR 体系什么是可以变化的
Taq E 一般用量是不是不变 做半定量时
谢谢各位高手
在丁香园 请教过，没人搭理～～～
谢谢每位回帖的虫子～～
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
老了，蹦跶不几年了
1楼 2008-05-09 08:32:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

辛雨237

铁杆木虫 (著名写手)
时间并不是确定不变的，是可以根据情况改变的，就要看你是做什么了
酶也是根据各个公司而有变化的，因为每个公司的酶浓度是不一样的
赞一下 回复此楼
春暖花开
2楼2008-05-09 08:42:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

七月的苹果

铜虫 (小有名气)
★
lixiaoyi1981(金币+1,VIP+0):如果说说摸条件的步骤就好了。谢谢你的解答。
1、温度和时间是可以变的，所以一般都先摸条件
2、半定量PCR：Semi-Quantitative RT-PCR
赞一下(10人) 回复此楼
3楼2008-05-09 08:54:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pph0259

木虫 (正式写手)
★ ★
lixiaoyi1981(金币+2,VIP+0):不错，谢谢哦。以后常来转转。
楼上是菜鸟啊，我来回答吧，
退火温度下是引物挂模板，不一定要45s，30s也可以，这个速度很快的，但长几秒也没关系；
72°是引物延伸，这个时间比较重要，一般根据你扩增片段大小决定，一般是1kb-1min。但通常这个时间也是足够足够的！
最后的72° 10min是经验值，相当于让最后的延伸好好延伸一番，是保险数值，不需要作特别考虑。
赞一下(10人) 回复此楼
4楼2008-05-09 10:03:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ldxmhyq

木虫 (著名写手)
学习了
回复此楼
做最好的自己，我能！
5楼2008-05-09 21:04:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

七月的苹果

铜虫 (小有名气)
摸条件主要是改变退火文，针对PCR产物效果好坏而定。Tm对于设定PCR退火温度是必需的。退火温度一般设定为比引物的Tm低5℃的温度。合理的退火温度为42-70℃。在理想状态下，退火温度应足够低，以保证引物同目的序列有效退火，同时还要足够高，以减少非特异性结合
赞一下 回复此楼
6楼2008-05-09 21:28:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wedyy0610

木虫 (职业作家)

老小孩
哦 谢谢大家
回复此楼
老了，蹦跶不几年了
7楼2008-05-10 08:56:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (著名写手)
本帖仅楼主可见
赞一下
8楼2008-05-10 10:28:37
已阅   申请BioEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页
相关版块跳转 我要订阅楼主 wedyy0610 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿211 初试270分 求调剂 +8 谷雨上岸 2026-03-23 9/450 2026-03-29 01:00 by 我是小康
[考研] 085701求调剂初试286分 +4 secret0328 2026-03-28 4/200 2026-03-28 21:09 by 15366876211
[考研] 食品工程专硕一志愿中海洋309求调剂 +4 小张zxy张 2026-03-26 8/400 2026-03-28 19:25 by lbsjt
[考研] 321求调剂 +6 璞玉~~ 2026-03-25 7/350 2026-03-28 17:48 by 璞玉~~
[考研] 311求调剂 +3 希望上岸阿小杨 2026-03-23 3/150 2026-03-28 07:57 by 热情沙漠
[考研] 张芳铭-中国农业大学-环境工程专硕-298 +4 手机用户 2026-03-26 4/200 2026-03-28 07:17 by mmm just
[考研] 求调剂推荐 材料 304 +15 荷包蛋hyj 2026-03-26 15/750 2026-03-28 04:13 by fmesaito
[考研] 275求调剂 +10 jjjjjjjjjjl 2026-03-27 10/500 2026-03-27 23:47 by barnett0632
[考研] 285求调剂 +4 AZMK 2026-03-27 7/350 2026-03-27 20:59 by AZMK
[考研] 272求调剂 +7 脚滑的守法公民 2026-03-27 7/350 2026-03-27 17:23 by laoshidan
[考研] 07化学280分求调剂 +10 722865 2026-03-23 10/500 2026-03-27 15:51 by Plutoqq
[考研] 求调剂，一志愿 南京航空航天大学大学 ，080500材料科学与工程学硕 +4 @taotao 2026-03-26 5/250 2026-03-27 08:10 by hypershenger
[考研] 求调剂 +8 Auroracx 2026-03-22 8/400 2026-03-26 19:55 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分，求调剂 +6 jiajunX 2026-03-22 6/300 2026-03-25 23:05 by licg0208
[考研] 求调剂 +3 李李不服输 2026-03-25 3/150 2026-03-25 13:03 by cmz0325
[考研] 293求调剂 +7 加一一九 2026-03-24 7/350 2026-03-25 12:02 by userper
[考研] 086003食品工程求调剂 +6 淼淼111 2026-03-24 6/300 2026-03-25 10:29 by 3Strings
[考研] 318求调剂 +3 plum李子 2026-03-23 3/150 2026-03-25 09:42 by 雾散后相遇lc
[考研] 341求调剂(一志愿湖南大学070300) +5 番茄头--- 2026-03-22 6/300 2026-03-23 23:45 by Txy@872106
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-23 4/200 2026-03-23 21:25 by pswait
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭