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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR产物放置-20℃一段时间后，条带发生改变的原因？
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wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上

[求助] PCR产物放置-20℃一段时间后，条带发生改变的原因？ 已有7人参与

十月中旬的样子做的PCR，凝胶电泳检测之后，条带是单一的大概在1000左右，是需要的目的条带，如图1。
      由于中间带本科生实验，耽误了些时间，一直将PCR产物放置-20℃保存。
      昨天将之前保存的PCR产物拿出来重新进行检测，发现目的条带只有400了，如图2，左一和左二，都是1500的marker。
      图二的 左三到左七都是用与之前做PCR同样的体系，同样的引物，同样的模板进行PCR的，结果条带也只有400.
      弄得我现在一头雾水，都不知道是啥原因，求各位帮忙解答一下。

PCR产物放置-20℃一段时间后，条带发生改变的原因？
图2.jpg


PCR产物放置-20℃一段时间后，条带发生改变的原因？-1
图1.jpg
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喜欢生物，所以想好好研究下去！
1楼 2014-10-29 11:42:25
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a50044758

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-10-31 23:20:37
可能是离子浓度的原因，同样的DNA样品用不同的BUFFER溶解后，跑的条带大小也会不一样，我觉得你两次PCR的产物是同一个片段。
赞一下 回复此楼
11楼2014-10-30 15:29:12
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去哪里看海

铁虫 (小有名气)
见过质粒变小的，没见过片段变小的，同求
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2楼2014-10-29 11:48:05
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-10-30 11:29:51
会被降解，我们这里这测过浓度，会有所降低，但没有跑过胶，总感觉你的片段减少的太多了···
赞一下 回复此楼
···
3楼2014-10-29 13:11:28
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wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小冀- at 2014-10-29 13:11:28
会被降解，我们这里这测过浓度，会有所降低，但没有跑过胶，总感觉你的片段减少的太多了···

换个marker试了一下，发现条带又在700左右，真是要疯了
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喜欢生物，所以想好好研究下去！
4楼2014-10-29 17:22:19
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