【答案】应助回帖

11楼2014-11-06 10:38:38

张永婧1991

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7楼: Originally posted by peterrjp at 2014-10-26 21:17:20
生工、天根的PCR切胶回收或过柱纯化试剂盒都没关系的。当年我专门负责T-RFLP分析仪...

你好，我还想请问一下~我把样品送到生工检测，数据已经回来了，我做的是猪肠道微生物多样性，我看大多数用这个方法的是土壤的。。。你做数据分析一般是在网站上对比数据吗？这个可靠吗？还有就是一般用哪些网站比较靠谱，我最近学习T-REX这个，可是总是出问题，请教大神呐！

12楼2014-11-06 10:45:23

硝化细菌

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T-RFLP酶切体系大家都是做多大体系的？

13楼2015-02-10 09:48:50

xiting0208

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10楼: Originally posted by 张永婧1991 at 2014-11-06 10:35:07
恩，我已经做好了，直接把PCR产物过柱纯化，然后再酶切的~...

酶切是直接琼脂糖电泳就可以看到酶切条带吗？为什么我切了快一个月却什么都没有切出来

努力却总失败的大烧杯

14楼2015-05-01 12:47:54

xiting0208

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10楼: Originally posted by 张永婧1991 at 2014-11-06 10:35:07
恩，我已经做好了，直接把PCR产物过柱纯化，然后再酶切的~...

PCR产物过柱纯化了，酶切怎么都切不出来，不知道问题出在了哪里，楼主求救命
酶切体系：PCR产物 15ul MspI 1ul，Rsal 1ul，Buffer 2ul，水 6ul

努力却总失败的大烧杯

15楼2015-05-05 16:58:55

xiting0208

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10楼: Originally posted by 张永婧1991 at 2014-11-06 10:35:07
恩，我已经做好了，直接把PCR产物过柱纯化，然后再酶切的~...

跪求楼主赐教，为什么我酶切切不出来，体系是：PCR产物（已过柱纯化） 15ul MspI 1ul Rsal 1ul Buffer 2ul 水 6ul
已经做了快两个月了，就是切不出来

努力却总失败的大烧杯

16楼2015-05-06 08:31:50

13310111

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【答案】应助回帖

也有可能是切完之后不同大小片段浓度太低，所以跑胶会看不出条带。

17楼2015-10-30 13:53:06

amy133253

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10楼: Originally posted by 张永婧1991 at 2014-11-06 10:35:07
恩，我已经做好了，直接把PCR产物过柱纯化，然后再酶切的~...

你好，麻烦问下，为什么我的16s引物27F上进行了FAM标记，然后用27F和1492R扩增，就是扩不出来条带是怎么回事

赶紧毕业吧

18楼2016-12-20 18:21:37