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张永婧1991

新虫 (初入文坛)

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9楼: Originally posted by j2 at 2014-10-28 21:28:22
不用loading buffer能跑出东西来?

能的,65度再失活30min就可以了,试剂公司说是可以的!
11楼2014-11-06 10:38:38
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张永婧1991

新虫 (初入文坛)

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7楼: Originally posted by peterrjp at 2014-10-26 21:17:20
生工、天根的PCR切胶回收或过柱纯化试剂盒都没关系的。当年我专门负责T-RFLP分析仪...

你好,我还想请问一下~我把样品送到生工检测,数据已经回来了,我做的是猪肠道微生物多样性,我看大多数用这个方法的是土壤的。。。你做数据分析一般是在网站上对比数据吗?这个可靠吗?还有就是一般用哪些网站比较靠谱,我最近学习T-REX这个,可是总是出问题,请教大神呐!
12楼2014-11-06 10:45:23
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硝化细菌

新虫 (初入文坛)

T-RFLP酶切体系大家都是做多大体系的?
13楼2015-02-10 09:48:50
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xiting0208

新虫 (初入文坛)

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10楼: Originally posted by 张永婧1991 at 2014-11-06 10:35:07
恩,我已经做好了,直接把PCR产物过柱纯化,然后再酶切的~...

酶切是直接琼脂糖电泳就可以看到酶切条带吗?为什么我切了快一个月却什么都没有切出来
努力却总失败的大烧杯
14楼2015-05-01 12:47:54
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xiting0208

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 张永婧1991 at 2014-11-06 10:35:07
恩,我已经做好了,直接把PCR产物过柱纯化,然后再酶切的~...

PCR产物过柱纯化了,酶切怎么都切不出来,不知道问题出在了哪里,楼主求救命
酶切体系:PCR产物 15ul MspI 1ul,Rsal 1ul,Buffer 2ul,水 6ul
努力却总失败的大烧杯
15楼2015-05-05 16:58:55
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xiting0208

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 张永婧1991 at 2014-11-06 10:35:07
恩,我已经做好了,直接把PCR产物过柱纯化,然后再酶切的~...

跪求楼主赐教,为什么我酶切切不出来,体系是:PCR产物(已过柱纯化) 15ul   MspI 1ul  Rsal 1ul Buffer 2ul 水 6ul
已经做了快两个月了,就是切不出来
努力却总失败的大烧杯
16楼2015-05-06 08:31:50
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13310111

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

也有可能是切完之后不同大小片段浓度太低,所以跑胶会看不出条带。
17楼2015-10-30 13:53:06
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amy133253

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 张永婧1991 at 2014-11-06 10:35:07
恩,我已经做好了,直接把PCR产物过柱纯化,然后再酶切的~...

你好,麻烦问下,为什么我的16s引物27F上进行了FAM标记,然后用27F和1492R扩增,就是扩不出来条带是怎么回事
赶紧毕业吧
18楼2016-12-20 18:21:37
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