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色谱柱安装及使用维护指南已有2人参与
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何谓常规反相色谱柱? 在硅胶或杂化基质颗粒上键合了如C18、C8、C4或苯基等键合相的色谱填料所装填的色谱柱,按反相色谱条件进行操作和分离。反相是液相色谱中最常使用的分离模式,而C18柱是最常使用的反相色谱柱之一。 新色谱柱开启和安装的推荐步骤: 使用新鲜洁净的水与乙腈。冲洗系统,确保系统干净,不含任何缓冲盐和污染物。 取用色谱柱时避免磕碰掉落。 将色谱柱入口端连接到系统上,柱出口端先不要连接,色谱柱身上有箭头标明正确流向。 在0.1 mL/min流速条件下用纯乙腈润洗色谱柱,然后在2分钟内将流速升至0.5 mL/min。 当溶剂均匀的从柱出口端流出,停流速,将色谱柱出口端接到系统检测器上(这样可以避免气泡进入检测系统,并且可快速达到基线平衡)。 重启流速,按照步骤4的方法逐渐提高流速,至常规分析时所使用的流速。 参考柱效测试报告中的方法,使用该流动相条件平衡色谱柱,通常需要使用5-10倍柱体积的流动相,直至压力与基线稳定。 测试柱效。如果没有柱效测试报告中的分析物,请联系沃特世化学消耗品部门寻求支持,使用合适的浓度与进样量。柱效结果略低于柱效测试报告属正常情况。如结果明显偏低、峰形拖尾,提示色谱柱和/或所使用的液相系统处于非理想状态,需要进行故障排查。 Waters网站上的方法:http://www.waters.com/waters/zh_CN/nav.htm?locale=122&cid=134814282 |
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