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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】怎样才能准确扩取一物种未知的功能基因
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神仙糊涂

[交流] 【求助/交流】怎样才能准确扩取一物种未知的功能基因

请教各位高手怎么养才能快速准确的扩取一个物种的未知的功能基因，在设计引物和PCR时都要注意些什么呢？

[ Last edited by 神仙糊涂 on 2008-5-5 at 10:12 ]
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1楼 2008-05-04 23:05:17
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tanhua

铁虫 (初入文坛)
听你的意思是要在一个物种中扩增其他物种中已报道的基因？即同源克隆？如果是这样，通常的方法就是把Genbank中所有的（太多的话可以有选择）同源基因作一个比对，根据亲缘相近物种的保守区段设计引物进行目的基因的扩增，对一些多拷贝的基因，PCR的时候可以适当放宽条件，不要过分要求特异性，挑克隆的时候可以多选择一些不同长度的片断，对单拷贝的基因，PCR的特异性适当提高。
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8楼2008-06-16 11:16:15
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神仙糊涂

各位高手快乐给两个困惑的小虫指条明路啊
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3楼2008-05-06 08:34:16
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paulajjh

木虫 (著名写手)
如果NCBI上有跟其同源性高的物种的功能基因的片段,可以拿过来用.但能否P出来是个未知数
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4楼2008-05-25 13:21:49
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paulajjh

木虫 (著名写手)
用软件设计引物,加酶切位点与保护序列
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5楼2008-05-25 13:22:35
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