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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】怎样才能准确扩取一物种未知的功能基因
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神仙糊涂

[交流] 【求助/交流】怎样才能准确扩取一物种未知的功能基因

请教各位高手怎么养才能快速准确的扩取一个物种的未知的功能基因，在设计引物和PCR时都要注意些什么呢？

[ Last edited by 神仙糊涂 on 2008-5-5 at 10:12 ]
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1楼 2008-05-04 23:05:17
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zyjwl2004

木虫 (正式写手)
同样的困惑
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2楼2008-05-05 18:55:59
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神仙糊涂

各位高手快乐给两个困惑的小虫指条明路啊
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3楼2008-05-06 08:34:16
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paulajjh

木虫 (著名写手)
如果NCBI上有跟其同源性高的物种的功能基因的片段,可以拿过来用.但能否P出来是个未知数
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4楼2008-05-25 13:21:49
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paulajjh

木虫 (著名写手)
用软件设计引物,加酶切位点与保护序列
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5楼2008-05-25 13:22:35
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★ ★ ★
reasonspare(金币+3,VIP+0):谢谢分享，欢迎常来
如果是全序列已知的物种，那么恭喜你，你的工作量将不是很大，而且结果出来也比较快。如果是全序列未知的物种，那么最可靠的方法可能就是通过构建文库，染色体步移了。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
6楼2008-05-25 14:02:42
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shzdx

银虫 (初入文坛)
有同样的困惑,我在用RACE做
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7楼2008-06-13 19:29:45
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tanhua

铁虫 (初入文坛)
听你的意思是要在一个物种中扩增其他物种中已报道的基因？即同源克隆？如果是这样，通常的方法就是把Genbank中所有的（太多的话可以有选择）同源基因作一个比对，根据亲缘相近物种的保守区段设计引物进行目的基因的扩增，对一些多拷贝的基因，PCR的时候可以适当放宽条件，不要过分要求特异性，挑克隆的时候可以多选择一些不同长度的片断，对单拷贝的基因，PCR的特异性适当提高。
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8楼2008-06-16 11:16:15
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)
你不会菌种名都没有定下来吧，要是菌种还没有定下来我想你还是先做个菌种鉴定吧，有了这个结果可能你的思路就多了！！要是菌种名定下来了你就去NCBI查查吧，同属的菌的基因也是很有参考价值的！！
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9楼2008-09-03 14:07:23
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