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风格176

新虫 (初入文坛)

[求助] 转膜条带老是扭曲 已有2人参与

最近做了好多次WB,发现条带老是扭曲,最严重的时候marker都歪了,后来转膜之后把胶考染了,胶上的条带是直的,但是膜上的条带依然是弯的;又一次转膜是用别的实验室的器材,电泳仪用的是自己的,bio-rad,条带也是弯的;还换过海绵垫,重配转膜液,都是一样的情况,每次都是最左边的几个孔弯曲最严重;我用的转膜液配方(1 L):glycine 11.25g,tris 3.05g,溶解后定容至800ml,加200ml甲醇,转膜250毫安恒流60min。滤纸没换过,难道是滤纸的原因?还是电泳仪的问题?求大神解答转膜条带老是扭曲
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爱笑的Q

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
转膜的电流会不会太高;膜与胶之间有没有存在气泡;转膜时会产生大量的热,有没有放入冰盒进行降温。
2楼2014-10-22 14:40:23
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风格176

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 爱笑的Q at 2014-10-22 14:40:23
转膜的电流会不会太高;膜与胶之间有没有存在气泡;转膜时会产生大量的热,有没有放入冰盒进行降温。

用冰袋降温的,以前转膜条件都是这样的,没什么问题,就是最近每次都这样,转之前我都是很仔细的赶掉气泡,最奇怪的是几乎每次都是同样地位置扭曲。。。
3楼2014-10-22 16:43:25
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曼舞流苏

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

是不是电泳仪的问题,或者是PVDF/NC膜的问题,有折叠的话估计也会影响到吧?你既然什么都换了,肿么不把这两个也换一换。。
4楼2015-01-12 11:51:42
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