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lchanlon

银虫 (小有名气)

[求助] Taqman探针荧光定量RT-PCR求救!!

各位前辈,各位老师,大家好。小弟当前遇到一个非常棘手的问题,望大家给予支持和帮助。问题:我设计了Taqman探针,做阴性对照时,每次会在30多个Ct值后会出现扩增。可以排除污染,排除探针降解,也没用ROX染料作校正。我用的是One-step RT-PCR,循现参数为:50℃ 25分钟;94℃ 2分钟;94 10秒;60 40秒(40 cycles);

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