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游动放线菌破壁
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有没有大神做过游动放线菌的破壁?用来提蛋白组,已经把能试的方法基本都试了一遍,效果都不太理想,跑胶上15ul的量颜色都不如Maker上5ul的深。 已经试过以下方法: 1.漩涡振荡,加0.1mm的玻璃粉 2.均质,用的是fastprep 用来提DNA的均质管(fast DNA for soil) 3.均质,把均质管中的研磨介质换成0.1mm玻璃粉 4.液氮研磨 5.液氮研磨后干粉再进行均质 6.超声 大神们还有没有其他方法可以用来破碎细胞的啊? 另外有个问题,均质用的研磨介质直径越大效果越好还是直径越小效果越好?因为试剂盒自带的均质管中含有一个4mm的玻璃珠,1.4mm的陶制小球和0.1mm的小硅球,破壁的效果比只用0.1mm的玻璃粉作为研磨介质的效果要稍微好一点。 |
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