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七小艾

新虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
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在线: 70.6小时
虫号: 1511345
注册: 2011-11-26
性别: MM
专业: 蛋白质组学

[求助] 游动放线菌破壁

有没有大神做过游动放线菌的破壁？用来提蛋白组，已经把能试的方法基本都试了一遍，效果都不太理想，跑胶上15ul的量颜色都不如Maker上5ul的深。
已经试过以下方法：
1.漩涡振荡，加0.1mm的玻璃粉
2.均质，用的是fastprep 用来提DNA的均质管（fast DNA for soil）
3.均质，把均质管中的研磨介质换成0.1mm玻璃粉
4.液氮研磨
5.液氮研磨后干粉再进行均质
6.超声
大神们还有没有其他方法可以用来破碎细胞的啊？
另外有个问题，均质用的研磨介质直径越大效果越好还是直径越小效果越好？因为试剂盒自带的均质管中含有一个4mm的玻璃珠，1.4mm的陶制小球和0.1mm的小硅球，破壁的效果比只用0.1mm的玻璃粉作为研磨介质的效果要稍微好一点。

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