24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (4924)
>导师招生 (715)
>找工作 (490)
>招聘信息布告栏 (413)
>虫友互识 (407)
>文献求助 (345)
>论文投稿 (226)
>学术会议 (217)
>休闲灌水 (212)
>考博 (159)
>博后之家 (133)
>基金申请 (131)
>硕博家园 (115)
>教师之家 (47)
>考研 (40)
>公派出国 (35)

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

haby1118

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 525
帖子: 66
在线: 8.8小时
虫号: 2862635

[交流] PCR,WB

大家好，最近有一个问题一直干扰着我，求助大家的帮忙与解答，就是我鉴定一种蛋白在动物组织上的表达，我前期从基因方面做了PCR,跑胶，测序，结果都成功了，也挺理想，但是最近做WB，就是做不出来，不知道是什么原因，怎么回事啊，这种蛋白到底存在吗？谁可以帮我深入分析分析

回复此楼

» 猜你喜欢

NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析已经有0人回复
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有241人回复
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点已经有0人回复
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂已经有0人回复
氢氧化钾活化操作已经有18人回复
散金已经有68人回复
生物质超级电容器已经有0人回复
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析已经有0人回复
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点已经有0人回复

1楼 2014-10-18 17:57:59

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

s_lich28

铜虫 (初入文坛)

应助: 11 (小学生)
金币: 151.3
帖子: 45
在线: 36.7小时
虫号: 1565667

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

楼主可以先查一下文献看有没有目标蛋白在其他组织表达的报道，如果有的话是不是做了WB，用的抗体是什么。建议楼主使用和文献相同的抗体。然后楼主可以用目标组织抽提液探讨一下抗体的使用条件，主要是上样量和抗体稀释倍数。一开始可以以看到目标条带（根据目标蛋白的分子量）为目的，别担心背景过高，等确定条带了以后可以减少上样量或者增加抗体稀释倍数来降低背景。希望对楼主有帮助。

赞一下(1人)

回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

haby1118

22楼2014-10-18 23:22:31

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 23 个回答

简单回复

九头狼狗2楼

2014-10-18 18:21 回复

haby1118(金币+1): 谢谢参与

。。 [ 发自小木虫客户端 ]

假大空4楼

2014-10-18 18:30 回复

haby1118(金币+1): 谢谢参与

查看全部 23 个回答