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行云流水郡

银虫 (小有名气)

[求助] 冰冻切片怎么会是这样的结果?

各位大侠好:
       我染的是视网膜组织的冰冻切片,可是为什么会出现这样的结果,所有的片子基本都是这样的,外边这个层次总是不清楚,不对焦。各位有何高见?
      我的步骤:
      1. 取下组织后直接冻-80°冰箱
     2. 拿出组织与切片机中 OCT包埋
     3. 切片 温度-17°
     4. 室温晾干过夜
     5. 放入-80°冰箱 备用
     6. 取出切片 与 pbs 常温 5min
     7. 冰丙酮 10min
     8. pbs洗5min
     9.  1%bsa封闭1h
    10、 pbs洗
    11. 一抗

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喜欢自由
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行云流水郡

银虫 (小有名气)

喜欢自由
4楼2014-10-17 11:18:05
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行云流水郡

银虫 (小有名气)

行云流水郡: 回帖置顶 2014-10-17 11:16:23
这是图片
冰冻切片怎么会是这样的结果?-1
22222.jpg

喜欢自由
2楼2014-10-17 11:15:54
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bbqlhb

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
行云流水郡: 金币+10, 博学EPI+1, ★★★很有帮助, 谢谢。 2014-10-18 12:36:35
切片厚度的问题吧,不对焦是因为不同层有不同对焦- -
3楼2014-10-17 11:17:58
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