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血液及骨髓标本的采集和处理
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一、检查项目 血液、骨髓液的细菌培养 二、标本采集 【标本采集前的注意事项】 应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集： 【标本送检指征】 病人出现以下临床表现，或同时具备以下几种临床表现时应采集血培养。 1.发热（≥38℃）或低温（≤36℃） 2.寒战 3.白细胞增多（＞10×10^9/L，特别有“核左移”时） 4.粒细胞减少（成熟的多形核白细胞＜1×10^9/L） 5.血小板减少 6.皮肤、粘膜出血 7.昏迷 8.多器官衰竭 9.血压降低 10.呼吸加快 几种特殊情况： 1.可疑新生儿败血症时，除发热或低温外，很少培养出细菌，应增加尿液和脑脊液培养。 2.老年菌血症病人可能不发热或不低温，如伴有身体不适、肌痛或中风，可能是感染性心内膜炎，也应采取血培养。 骨髓培养与血液培养的送检指征是基本一致的，临床常规血液感染有指征时以抽取血培养为主。但当骨髓炎时或长期使用抗菌药物患者，抽取骨髓培养阳性率会远高于血培养。 【标本采集的容器】 血培养仪配套血培养瓶或手工血培养瓶。 【标本的采集方法】 防止皮肤寄生菌或环境微生物引起的污染是血培养的关键问题，采血前严格执行消毒程序是十分重要的。 1.皮肤消毒程序 严格按以下三步法进行： (1) 75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上。 (2) 用一根碘酊或聚维酮碘（碘伏）棉签消毒皮肤，1～2％碘酊作用30s或聚维酮碘作用60s，从穿刺点向外以1.5～2cm直径画圈进行消毒。 (3) 75％酒精脱碘。 对碘过敏的病人只能用75%酒精消毒，消毒60s，待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血。 2.培养瓶消毒程序 (1) 用75％酒精消毒血培养瓶橡皮塞子。 (2) 酒精作用60s。 (3) 在血液注入血培养瓶之前，用无菌纱布或棉签清除橡皮塞子表面剩余的酒精，然后注入血液。 3.培养瓶接种程序 抽取血液后，不要换针头，直接注入血培养瓶中，轻轻颠倒混匀，以防血液凝固。如果同时作需氧和厌氧培养，应先将标本接种到厌氧瓶中，然后再注入需氧瓶，严格防止将空气注入厌氧瓶中。 【标本采集注意事项】 1.血培养采集的时间和频率 (1) 采血培养应尽量在抗菌药物使用之前，在24h内采集2～3份血培养（一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养），每次2瓶。因为研究已证实，2～3份血培养足以检测所有的菌血症和真菌血症。 (2) 入院前2周内接受抗菌药物治疗的患者，连续3天，每天采集2份，可选用能中和或吸附抗菌药物的培养基。 (3) 对间歇性寒战或发热的患者，应在寒战或体温高峰到来之前0.5～1h采集血液，或于寒战或发热后1h采集。因为发热时血液中可能没有细菌。 (4) 可疑为急性原发性菌血症、真菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎或肺炎的患者，应在不同部位采集2～3份血培养。 (5) 不明原因发热，如隐性脓肿、伤寒热和波浪热，先采集2～3份血标本，24～36h后估计体温升高之前，再采集2份以上。 (6) 可疑为菌血症或真菌血症，但血培养持续阴性，应改变血培养方法，选择其它种类的培养瓶，如高渗培养瓶、中和抗生素培养瓶、结核菌培养瓶等，以获得罕见的或苛氧的微生物。 (7) 可疑为细菌性心内膜炎，在1～2h内多部位采集3份血标本，如果24h阴性，再采取3份以上的血标本。 2.采血量 成人：推荐每个血培养瓶应加的血量为5～10ml，血液和肉汤比为1：5～10（体积：体积）。 儿童：因很难获得大量的血液，一般静脉采血1～5ml用于血培养。 血液量太多或太少都不利于细菌的检出，血液的培养量每增加1ml,阳性率增加3～5％。人体血液内包含各种抑制细菌生长的因子或抗生素，注入血液太多可能会抑制细菌的生长。 骨髓采血量一般为1～2ml。 *标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染。 【标本的保存】 含血样的培养瓶应立即送往实验室；如不能及时送检，应将其放在室温，切忌冰箱存放。因为某些苛氧菌可在冰箱温度中死亡，而使培养阳性率下降。 在运往实验室的途中如果天气寒冷，应采取一定的保温措施。 |
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