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mjzjily

铜虫 (初入文坛)

[交流] 不同杂交瘤细胞产同一种蛋白,是否有差异?

我有一个问题,求解与论坛上各位前辈:假设我现在从人体中分离出了一种蛋白A,并且也知道了它的基因序列。那么而后我克隆了该基因,通过杂交瘤细胞技术外源表达了该蛋白。
1. 我用海拉细胞制备杂交细胞(人源的),制得蛋白A1;
2,用小鼠骨瘤细胞制备杂交细胞,制得蛋白A2。
虽然两者的基因一样,但是宿主有差别,我考虑到蛋白的表达过程中,翻译后的加工修饰对蛋白活性有影响。如上述,不同来源的杂交细胞所产的蛋白A1和A2,会不会因为宿主的不同而存在差异?甚至两者都与从人体直接分离所得的蛋白A,均存在差异?
       还有,如果有差异,差异体现在什么地方,是不是翻译后的修饰加工不同了?深层次讲,是不是蛋白的空间构像和核心区域结构,出现了差异?

谢谢
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扎实科研
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scqing

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你克隆的A蛋白表达出来后,需要纯化分离出来吗?
3楼2014-10-15 09:26:06
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
科学有无限的可能性,只要是没有证伪的都可能,即使证伪的以后也可能实现,科研本来就是不断刷新知识
2楼2014-10-15 09:19:47
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mjzjily

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by scqing at 2014-10-15 09:26:06
你克隆的A蛋白表达出来后,需要纯化分离出来吗?

需要的。而且各批次所采用的纯化方法不一定相同。是不是不同的纯化方法也会改变蛋白的特异性?
扎实科研
4楼2014-11-24 10:51:50
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