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a1249886766

银虫 (小有名气)

[求助] DNA杂交 已有1人参与

我的两条链的Tm值均为48摄氏度,因为链的端部连有生物素和亲和素,想问这两条链室温下可以杂交吗?看文献上说要先95摄氏度加热5min,再降温,方可实现杂交吗?杂交大概需要多长时间呢?不胜感激!
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科研
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a1249886766

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 熈苘 at 2014-10-13 15:24:52
具有互补碱基序列的DNA分子,可以通过碱基对之间形成氢键等,形成稳定的双链区。在进行DNA分子杂交前,先要将两种生物的DNA分子从细胞中提取出来,再通过加热或提高pH的方法,将双链DNA分子分离成为单链,这个过程称 ...

亲,我买了两条互补的单链,在使它们两个杂交前,需要加热到95摄氏度吗?因为溶液中还含有蛋白质,我怕使蛋白失活。不加热直接室温杂交行吗?会不会杂交率低呢?
科研
4楼2014-10-13 18:25:49
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熈苘

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
a1249886766: 金币+5, 有帮助, 谢谢你。 2014-10-13 18:26:46
具有互补碱基序列的DNA分子,可以通过碱基对之间形成氢键等,形成稳定的双链区。在进行DNA分子杂交前,先要将两种生物的DNA分子从细胞中提取出来,再通过加热或提高pH的方法,将双链DNA分子分离成为单链,这个过程称为变性。希望对你有帮助
3楼2014-10-13 15:24:52
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乐小sana

金虫 (小有名气)

想请问下楼主,你的这个问题怎么解决的?到底能不能加热啊?我现在也碰到了这样的问题
5楼2017-06-05 20:25:46
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