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a1249886766

银虫 (小有名气)

[求助] DNA杂交 已有1人参与

我的两条链的Tm值均为48摄氏度，因为链的端部连有生物素和亲和素，想问这两条链室温下可以杂交吗？看文献上说要先95摄氏度加热5min，再降温，方可实现杂交吗？杂交大概需要多长时间呢？不胜感激！
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科研
1楼 2014-10-12 21:29:01
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dyr121110

金虫 (正式写手)
太高端，不懂
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多多交流
2楼2014-10-13 14:34:14
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熈苘

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
a1249886766: 金币+5, ★有帮助, 谢谢你。 2014-10-13 18:26:46
具有互补碱基序列的DNA分子，可以通过碱基对之间形成氢键等，形成稳定的双链区。在进行DNA分子杂交前，先要将两种生物的DNA分子从细胞中提取出来，再通过加热或提高pH的方法，将双链DNA分子分离成为单链，这个过程称为变性。希望对你有帮助
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3楼2014-10-13 15:24:52
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a1249886766

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 熈苘 at 2014-10-13 15:24:52
具有互补碱基序列的DNA分子，可以通过碱基对之间形成氢键等，形成稳定的双链区。在进行DNA分子杂交前，先要将两种生物的DNA分子从细胞中提取出来，再通过加热或提高pH的方法，将双链DNA分子分离成为单链，这个过程称 ...

亲，我买了两条互补的单链，在使它们两个杂交前，需要加热到95摄氏度吗？因为溶液中还含有蛋白质，我怕使蛋白失活。不加热直接室温杂交行吗？会不会杂交率低呢？
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科研
4楼2014-10-13 18:25:49
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乐小sana

金虫 (小有名气)
想请问下楼主，你的这个问题怎么解决的？到底能不能加热啊？我现在也碰到了这样的问题
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5楼2017-06-05 20:25:46
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