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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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sweetqm

木虫 (初入文坛)

[求助] miRNA提取 已有2人参与

血液中 miRNA 的提取  ,血液的要求是抗凝血还是非抗凝血呢?有什么区别呢?
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Merrylegs

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
sweetqm(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-13 08:44:23
有一篇文献做过对比,血浆和血清提取的效果差异不大,都可以。
2楼2014-10-12 20:22:36
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hyuqing

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【答案】应助回帖


sweetqm(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-20 08:43:36
血清里的RNA应该是含量极低的,因为核酸一般都在细胞里,所以提取RNA不一定必须用血清吧,用非抗凝血,也可以用血沉沉淀吧?
3楼2014-10-17 13:36:31
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sweetqm

木虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by hyuqing at 2014-10-17 13:36:31
血清里的RNA应该是含量极低的,因为核酸一般都在细胞里,所以提取RNA不一定必须用血清吧,用非抗凝血,也可以用血沉沉淀吧?

由于课题的需要,所以只能用血清或是血浆。您是做miRNA的吗?知道做测定一个miRNA的PCR大概用多少血浆够吗?
4楼2014-10-17 20:31:07
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hyuqing

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Enriching beads


★ ★
sweetqm(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-10-20 08:43:50
引用回帖:
4楼: Originally posted by sweetqm at 2014-10-17 20:31:07
由于课题的需要,所以只能用血清或是血浆。您是做miRNA的吗?知道做测定一个miRNA的PCR大概用多少血浆够吗?...

每个反应体系为5μl,包括1μl稀释后的cD- NA、0.25μl20×miRNA检测探针、2.5μl2×基因表 达MasterMix、1.25μl双蒸水。每个miRNA检测配置3平行所需的体系,轻柔混匀,使用ABIPrism 7900荧光定量PCR仪,PCR的反应条件:95℃5min→95℃15s,60℃1min进行45个循环。检测的miRNA和cel-miR-39在同一块384孔板上进行定量检测。原始数据用SDS软件进行初步分析。
不好意思呢,我只是研究蛋白质、RNA、DNA还有一些要分子富集的~~~具体用多少我也不太清楚,上面的那段话可以参考参考,是在文献中看到的哦,文献名是:《血清/血浆microRNA检测方法探讨与建立》
5楼2014-10-19 18:28:35
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6楼2017-08-18 05:58:13
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7楼2017-08-19 21:12:06
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