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jinling158

铜虫 (小有名气)

[交流] 求助质粒提取

我用试剂盒提的质粒,不知为什么加入solution3室温放置2分钟再室温离心之后,沉淀位于离心管的中间位置,而不是在底部。这是怎么回事呀?是不是我取的菌量太多的缘故?
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shenqicc

金虫 (小有名气)

你说的加完了solution3之后,离心沉淀在离心管中间位置应该是附在壁上了吧?其实这个没关系的,你只要吸清液就行了,我们也经常会碰到这种情况!是里面的蛋白质太多了吧!~~
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5楼2008-04-29 22:39:37
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mark32280667806

是否在加入后马上混合了的,不能全部加完了再混合,还有最好还是在冰上多放几分钟。
2楼2008-04-29 18:32:53
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tody4617

木虫 (小有名气)

一根筋家族之独根草

哥们,这很正常,只要你吸上清就没问题,而且稍微吸一些白色的物质都没问题,因为你下一步还要用氯仿抽提嘛,如果要问是什么原因,我觉得一个是你菌加得太多,或者说你的菌太浓,另一个离心不够。
另外,我建议你别用试剂盒,有时根本抽不出来(不骗你),我们实验室除了必要的酶,引物等是买的外,全部都是自己配的,而且抽提下过很好。
至于冰不病浴,我也觉得不是大问题,我抽过这么多质粒,从来没冰浴过,而且我也没用什么25:24:1的溶液,只用氯仿足够了,不是书上写什么我们就要一定做什么,达到目的为最终目标。
票子-房子-车子-婆子-儿子
3楼2008-04-29 19:31:50
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superwheat

银虫 (正式写手)

我们一般用博大泰克和天根的kit,一般都能抽得出来的
4楼2008-04-29 20:23:20
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