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做高速逆流色谱的高手: 俩个峰离的很近,怎么改变体系增大极性还是减小极性? |
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2楼2008-05-22 21:11:37
★ ★
xy4585618(金币+2,VIP+0):多谢参与
xy4585618(金币+2,VIP+0):多谢参与
| 如果你一针进去,周期30min,那么10-20min出峰的流动相极性就合适,一般会选择梯度洗脱,峰分不开,可以的解决办法是(如果你不是梯度洗脱,改成梯度的试试),加酸甲酸、三氟乙酸皆可,千分之一的浓度有机相、水相都能加,但做LC-MS流动相不能用三氟乙酸;加盐,一般是醋酸胺,直接加入水相10-50mM之间调整,因为可能化合物跟柱填料直接作用比较强,洗脱的时候就会发生严重拖尾,峰分离度不好,一般加入醋胺不会影响出峰时间,但会让峰变尖,峰形好,分离度也会好一些。如果你是因为其他原因,建议原本用把流动相体系调整,甲醇、乙腈、丙酮都是常用的有机相,有可能你的化合物在你原本选定有机相中溶解度不好,也会导致峰分不开。如果上述方法都试过,还是不行,建议你先测测原来的柱子的柱效,如果柱效良好就考虑换柱子了,要分的化合物一个有苯基结构或者是亲酯性而另一个没有,建议你用苯基柱,两个在正相板上能分开的话,可能有不同的极性基团,建议你选用氰基柱或者氨基柱。换柱子后还可以按照上述方法来试溶剂体系。 |
3楼2008-07-28 23:04:58













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