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做高速逆流色谱的高手： 俩个峰离的很近，怎么改变体系增大极性还是减小极性？ |
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2楼2008-05-22 21:11:37
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xy4585618(金币+2,VIP+0):多谢参与
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| 如果你一针进去，周期30min，那么10-20min出峰的流动相极性就合适，一般会选择梯度洗脱，峰分不开，可以的解决办法是（如果你不是梯度洗脱，改成梯度的试试），加酸甲酸、三氟乙酸皆可，千分之一的浓度有机相、水相都能加，但做LC-MS流动相不能用三氟乙酸；加盐，一般是醋酸胺，直接加入水相10-50mM之间调整，因为可能化合物跟柱填料直接作用比较强，洗脱的时候就会发生严重拖尾，峰分离度不好，一般加入醋胺不会影响出峰时间，但会让峰变尖，峰形好，分离度也会好一些。如果你是因为其他原因，建议原本用把流动相体系调整，甲醇、乙腈、丙酮都是常用的有机相，有可能你的化合物在你原本选定有机相中溶解度不好，也会导致峰分不开。如果上述方法都试过，还是不行，建议你先测测原来的柱子的柱效，如果柱效良好就考虑换柱子了，要分的化合物一个有苯基结构或者是亲酯性而另一个没有，建议你用苯基柱，两个在正相板上能分开的话，可能有不同的极性基团，建议你选用氰基柱或者氨基柱。换柱子后还可以按照上述方法来试溶剂体系。 |
3楼2008-07-28 23:04:58
