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青苹果QT

金虫 (小有名气)

[求助] 银染问题 已有2人参与

我的蛋白质银染染不出来,但是做western 的时候却有条带,
为什么呢?
苦恼
急求解
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朱亚淑

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-09-30 12:33:37
我寻到的经验是:1.取下凝胶用去离子水冼胶30秒三次,
2.0.1% 硝酸银染色10分钟.
3.弃去染色液,蒸馏水洗胶1分钟(换2次去离子水)
4.显色液显色15秒,换用新的显色液,显清条带为止.不要试图将所有的条带都显出来,要求越高可能导致背景就深,
5.染色后要用固定液(冰乙酸)终止染色,
6.固定3分钟后再用去离子水洗涤2遍(整个试验比较费去离子水)。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2014-09-29 23:38:18
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青苹果QT

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 朱亚淑 at 2014-09-29 23:38:18
我寻到的经验是:1.取下凝胶用去离子水冼胶30秒三次,
2.0.1% 硝酸银染色10分钟.
3.弃去染色液,蒸馏水洗胶1分钟(换2次去离子水)
4.显色液显色15秒,换用新的显色液,显清条带为止.不要试图将所有的条带都显出来, ...

我是用的试剂盒
3楼2014-09-30 08:32:03
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-09-30 12:33:41
蛋白质少吧,WB比银染敏感。
4楼2014-09-30 11:00:39
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