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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 用supermix酶跑出来电泳条带居然是清晰的颗粒状，求解！
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ggyy0911

铁虫 (正式写手)

[求助] 用supermix酶跑出来电泳条带居然是清晰的颗粒状，求解！ 已有2人参与

这两天照胶的坏了，用小紫外照的，大家凑合看吧。我用的5000的Marker，目的条带3078bp，已经成功扩增出来了，但是居然是这样的颗粒状。
用的2×Eco Taq PCR Supremix，不知道是不是酶的问题，因为不设计loading buffer，电泳时候直接PCR产物点样的。上样量5ul。
之后又做了一次，换了新的电泳液，点样量减到了1.5ul，结果一样。亮度和Marker相同了，但是还是清晰的颗粒物。
百思不得其解。

用supermix酶跑出来电泳条带居然是清晰的颗粒状，求解！
2014-09-28_14-01-38_598.jpg
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1楼 2014-09-29 21:36:34
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wshi85

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-09-30 12:35:12
我也碰到过这样的情况！这肯定不是酶的问题，是电泳胶的问题，切胶回收测序都没问题的！
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很久没在虫虫上漂游了，觉得回归虫虫！
2楼2014-09-29 23:06:11
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ggyy0911

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wshi85 at 2014-09-29 23:06:11
我也碰到过这样的情况！这肯定不是酶的问题，是电泳胶的问题，切胶回收测序都没问题的！

谢谢～我想过是胶的问题，可是为什么Marker不是颗粒状？这不是在同一块胶里么……

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3楼2014-09-30 07:44:20
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aoaoshch

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-09-30 12:35:16
PCR没有问题，你的胶好像不是太好，是不是已经凉了才倒的，或者溶胶是没有彻底融化、摇匀。
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4楼2014-09-30 09:09:12
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wshi85

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by ggyy0911 at 2014-09-30 07:44:20
谢谢～我想过是胶的问题，可是为什么Marker不是颗粒状？这不是在同一块胶里么……
...

这个我倒没太留意，不过marker里面的成分和pcr的成分有些差别，因此就跑出了上面的结果吧，这也仅是我的猜测！
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很久没在虫虫上漂游了，觉得回归虫虫！
5楼2014-10-01 12:48:00
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