应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR结果不稳定，一会儿P不出来，再做一次又P出来了，又做一次条带大小又不对了
52/1返回列表
查看: 2776  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

白色帝企鹅

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR结果不稳定，一会儿P不出来，再做一次又P出来了，又做一次条带大小又不对了 已有6人参与

到底是怎么回事，真心给跪了，求大神指导
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2014-09-28 21:06:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

意萧02

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

这个问题我也遇到过，第一个原因可能是引物特异性不好，要提高特异性，可以用touch down或者slowdown试试。第二个原因我也说不清楚，就是你点个3-5ul看看，有时候点样点多了也会造成没有目的条带，特别是胶回收的时候，经常可能会没有目的条带。第三个就是引物设计问题，再设一次或者让别人设一对也试试！

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
12楼2014-11-02 08:51:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-28 23:38:18
原因很多，要逐一排除，模板纯度及浓度，PCR反应条件是否合适，引物是否合适。
赞一下 回复此楼
2楼2014-09-28 22:16:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bwangel

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-10-01 12:48:59
引物扩增效率不好，外加引物不特异，
赞一下 回复此楼
3楼2014-09-29 07:33:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

白色帝企鹅

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by stone2239 at 2014-09-28 22:16:37
原因很多，要逐一排除，模板纯度及浓度，PCR反应条件是否合适，引物是否合适。

模板使用Kit抽的，浓度也还行，条件是之前摸过的，而且之前师姐做过，引物应该没问题啊？
赞一下 回复此楼
4楼2014-09-29 10:24:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭