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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助】请教一下sf9细胞的培养条件和经验
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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superwheat

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助】请教一下sf9细胞的培养条件和经验

ATCC不知道为什么，怎么也打不开。

是不是要33度，5%CO2培养的？
此外，我往上查到有些人用无血清合成培养基，有些是加了10%的血清，究竟需不需要加血清培养，效果有什么不同呢？我还看到有专门的昆虫细胞培养血清，又没有必要买呢？
还有肝素，水解乳蛋白，酵母，是不是都要添加的？
还有如果用无血清培养，冻存细胞的时候需不需要添加20%的血清呢？

我需要做蛋白表达，我看到有人说直接把细胞培养出来的病毒回收，加到新细胞里面就可以了感染和表达蛋白了，但有看过一个说法是要培养p1,p2,p3代以后才能用来感染细胞，我有点迷惑。

另外，是否无血清培养表达蛋白的时候，需要添加蛋白酶抑制剂呢？

[ Last edited by superwheat on 2008-4-25 at 15:47 ]
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1楼 2008-04-25 15:43:20
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黑罕

金虫 (小有名气)
我是这么做的
是28度5%CO2培养
加血清的GRACE培养
要培养p1,p2,p3代
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2楼2008-04-28 16:59:52
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superwheat

银虫 (正式写手)
请教一下，P1P2P3代其实是代表什么意思的？这样做是为了什么呢？
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3楼2008-04-29 00:54:06
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sevenlight967

银虫 (小有名气)
1. 要不要加血清。
　depends on 你的细胞来源。有的sf9细胞需要血清，有的已经adapted不再用血清。你也可以自己adapt要血清的sf9细胞至不用血清。去invitrogen上查吧，原来是gibco的，后来invitrogen收购了
2. 关于培养的一些问题
　同上，查公司的instruction
3. P1, P2, P3是为了提高病毒的滴度。理论上讲P3>P2>P1. 但也不一定，所以每次最好检测病毒的滴度。
4. 培养的时候当然不用加蛋白酶抑制剂了。分离纯化的时候再加
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4楼2008-04-29 01:59:26
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savid888

木虫 (正式写手)
sf9我养过，来自于草地滩夜蛾，还有一个克隆株sf21。
很好养，Grace培养基就可，需要添加水解乳蛋白，血清就是普通的胎牛血清，10％浓度。28摄氏度，不需CO2条件下培养。
如果你要表达纯化蛋白的话，应该选用无血清培养基，当然要经过一个驯化的过程。
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5楼2008-04-29 10:31:08
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gangrisenge

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
我也在做，大家可以交流下。
gangrisenge2007@163.com
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6楼2011-08-19 19:33:23
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