应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助】请教一下sf9细胞的培养条件和经验
51/1返回列表
查看: 1056  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

superwheat

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助】请教一下sf9细胞的培养条件和经验

ATCC不知道为什么，怎么也打不开。

是不是要33度，5%CO2培养的？
此外，我往上查到有些人用无血清合成培养基，有些是加了10%的血清，究竟需不需要加血清培养，效果有什么不同呢？我还看到有专门的昆虫细胞培养血清，又没有必要买呢？
还有肝素，水解乳蛋白，酵母，是不是都要添加的？
还有如果用无血清培养，冻存细胞的时候需不需要添加20%的血清呢？

我需要做蛋白表达，我看到有人说直接把细胞培养出来的病毒回收，加到新细胞里面就可以了感染和表达蛋白了，但有看过一个说法是要培养p1,p2,p3代以后才能用来感染细胞，我有点迷惑。

另外，是否无血清培养表达蛋白的时候，需要添加蛋白酶抑制剂呢？

[ Last edited by superwheat on 2008-4-25 at 15:47 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2008-04-25 15:43:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黑罕

金虫 (小有名气)
我是这么做的
是28度5%CO2培养
加血清的GRACE培养
要培养p1,p2,p3代
赞一下 回复此楼
2楼2008-04-28 16:59:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

superwheat

银虫 (正式写手)
请教一下，P1P2P3代其实是代表什么意思的？这样做是为了什么呢？
赞一下 回复此楼
3楼2008-04-29 00:54:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sevenlight967

银虫 (小有名气)
1. 要不要加血清。
　depends on 你的细胞来源。有的sf9细胞需要血清，有的已经adapted不再用血清。你也可以自己adapt要血清的sf9细胞至不用血清。去invitrogen上查吧，原来是gibco的，后来invitrogen收购了
2. 关于培养的一些问题
　同上，查公司的instruction
3. P1, P2, P3是为了提高病毒的滴度。理论上讲P3>P2>P1. 但也不一定，所以每次最好检测病毒的滴度。
4. 培养的时候当然不用加蛋白酶抑制剂了。分离纯化的时候再加
赞一下 回复此楼
4楼2008-04-29 01:59:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

savid888

木虫 (正式写手)
sf9我养过，来自于草地滩夜蛾，还有一个克隆株sf21。
很好养，Grace培养基就可，需要添加水解乳蛋白，血清就是普通的胎牛血清，10％浓度。28摄氏度，不需CO2条件下培养。
如果你要表达纯化蛋白的话，应该选用无血清培养基，当然要经过一个驯化的过程。
赞一下 回复此楼
5楼2008-04-29 10:31:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gangrisenge

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
我也在做，大家可以交流下。
gangrisenge2007@163.com
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2011-08-19 19:33:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 superwheat 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 6/300 2026-11-05 18:11 by My20PsvIExYO
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 6/300 2026-11-05 18:00 by My20PsvIExYO
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 11/550 2026-11-05 17:58 by My20PsvIExYO
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-05 17:58 by My20PsvIExYO
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 kvewwGtKktqB 2026-11-04 8/400 2026-11-05 17:47 by My20PsvIExYO
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 kvewwGtKktqB 2026-11-04 11/550 2026-11-05 17:47 by My20PsvIExYO
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 13/650 2026-11-05 17:47 by My20PsvIExYO
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-05 17:36 by My20PsvIExYO
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-05 17:36 by My20PsvIExYO
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 11/550 2026-11-05 17:36 by My20PsvIExYO
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 9/450 2026-11-05 17:25 by My20PsvIExYO
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 19/950 2026-11-05 17:25 by My20PsvIExYO
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 7/350 2026-11-05 16:08 by My20PsvIExYO
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 7/350 2026-11-05 16:08 by My20PsvIExYO
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-05 15:46 by My20PsvIExYO
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 10/500 2026-11-05 15:35 by My20PsvIExYO
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-05 15:24 by My20PsvIExYO
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 9/450 2026-11-05 15:13 by My20PsvIExYO
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-05 10:39 by PYZmcHr5kSaq
[基金申请] 各位基础老师们，看完中央《从严治党》的决定后，对学术界更加有信心了吧 +5 iaeyuan 2026-11-01 5/250 2026-11-04 14:43 by jinchengzi
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭