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helenfang

铜虫 (小有名气)

[交流] OD和菌量

请教各位:本人液体培养一种芽胞杆菌,培养基有颜色,因实验需要,希望通过OD值来判断菌量的多少,目前进行预实验,同时通过菌落计数来验证是否OD值真能反应菌量的多少,因这个菌会产荚膜,会导致培养基有点粘稠。最终结果似乎是不对应的,即有的菌液OD小但菌量还挺大的。
请问是不是培养基有颜色会导致OD 不能正确反应菌量的多少呢,另外OD值和菌体大小有关系吗,谢谢各位解答。。。
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xiongxianghua

新虫 (初入文坛)

OD值与菌体大小是有关系的,如大肠杆菌与酵母一个OD值对应的细菌数就差一个数量级。另外OD值与平板计数是不能混为一谈的,因为OD值测量包括死菌,而平板上长出来的当然是活菌.另外别的因素也会影响,如OD值测量用600nm波长,在此波长有吸收的杂质如色素肯定会影响OD值与菌体量的对应关系。虽然活菌记数麻烦且不容易做好,但比较准确的还是活菌记数.
6楼2008-04-25 11:25:46
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qijilaji

金虫 (小有名气)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):虫友很热情,也很幽默, 希望别人误解你的意思
一般测OD值都是用来画生长曲线的,你想建立OD值和细胞密度的关系也不是不可以,但是估计误差会比较大,取样的均匀程度、培养液里的色素含量变化、培养基残渣都会产生误差。对于同一株菌来说,菌体大小对OD值的影响一般都不用考虑了,想得太复杂伤脑细胞
2楼2008-04-24 14:45:14
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James685

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
菌液中很多因素能够影响OD值的,例如培养基残渣、死菌等,而平板计算出来的只是活菌数。
3楼2008-04-24 15:15:55
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bulebird

金虫 (小有名气)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):积极交流奖
取一定量的菌液离心,用无菌水洗涤离心后重新悬浮,可消弱培养基颜色的影响。
4楼2008-04-24 15:47:10
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