24小时热门版块排行榜    

查看: 245  |  回复: 10
当前主题已经存档。

helenfang

铜虫 (小有名气)

[交流] OD和菌量

请教各位:本人液体培养一种芽胞杆菌,培养基有颜色,因实验需要,希望通过OD值来判断菌量的多少,目前进行预实验,同时通过菌落计数来验证是否OD值真能反应菌量的多少,因这个菌会产荚膜,会导致培养基有点粘稠。最终结果似乎是不对应的,即有的菌液OD小但菌量还挺大的。
请问是不是培养基有颜色会导致OD 不能正确反应菌量的多少呢,另外OD值和菌体大小有关系吗,谢谢各位解答。。。
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qijilaji

金虫 (小有名气)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):虫友很热情,也很幽默, 希望别人误解你的意思
一般测OD值都是用来画生长曲线的,你想建立OD值和细胞密度的关系也不是不可以,但是估计误差会比较大,取样的均匀程度、培养液里的色素含量变化、培养基残渣都会产生误差。对于同一株菌来说,菌体大小对OD值的影响一般都不用考虑了,想得太复杂伤脑细胞
2楼2008-04-24 14:45:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

James685

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
菌液中很多因素能够影响OD值的,例如培养基残渣、死菌等,而平板计算出来的只是活菌数。
3楼2008-04-24 15:15:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bulebird

金虫 (小有名气)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):积极交流奖
取一定量的菌液离心,用无菌水洗涤离心后重新悬浮,可消弱培养基颜色的影响。
4楼2008-04-24 15:47:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

helenfang

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by qijilaji at 2008-4-24 14:45:
一般测OD值都是用来画生长曲线的,你想建立OD值和细胞密度的关系也不是不可以,但是估计误差会比较大,取样的均匀程度、培养液里的色素含量变化、培养基残渣都会产生误差。对于同一株菌来说,菌体大小对OD值的影响 ...

我实验用的是同一属的芽孢杆菌,实验要求这几种菌的接入液体培养基中的接种量一致,我不知道应该用哪种方法比较方便快捷,尝试使用OD值的大小来判断菌量的多少,但我发现这几种菌菌体大小有些差异,好像有个菌体较小的菌OD很小但涂板计数后数量还是很多的,所以我在想是不是菌体大小会影响OD。
谢谢!
5楼2008-04-24 20:51:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiongxianghua

新虫 (初入文坛)

OD值与菌体大小是有关系的,如大肠杆菌与酵母一个OD值对应的细菌数就差一个数量级。另外OD值与平板计数是不能混为一谈的,因为OD值测量包括死菌,而平板上长出来的当然是活菌.另外别的因素也会影响,如OD值测量用600nm波长,在此波长有吸收的杂质如色素肯定会影响OD值与菌体量的对应关系。虽然活菌记数麻烦且不容易做好,但比较准确的还是活菌记数.
6楼2008-04-25 11:25:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

helenfang

铜虫 (小有名气)

楼上朋友说的非常好,非常感谢。那我想问下我有几种胶质芽胞杆菌(我想菌体大小应该不会相差太大吧),同时培养,同样的培养基,培养相同的时间测OD,我想这样测得的OD大小应该能大致反应菌量的多少关系吧。谢谢。。
7楼2008-04-25 12:34:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rinp

木虫 (正式写手)

用没长菌培养基当空白对照不行吗
海到无边天做岸山登绝顶我为峰.博士学位就是鞋里的一粒米,不拿不舒服,拿了不能吃!
8楼2008-04-25 12:50:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangqihong

铁虫 (小有名气)

我最近经常测古菌Sto的OD值,我想OD值跟菌体大小、培养基(颜色、是否混浊等)等因素有关,当然测定时所选的光源波长也会影响OD值。测OD值时,一是以空白培养基作对照,二是注意温度(包括仪器温度和菌液温度)的控制,另外对该菌会产荚膜,是否考虑用稀释的方法。
9楼2008-04-25 17:36:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qijilaji

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by rinp at 2008-4-25 12:50:
用没长菌培养基当空白对照不行吗

先申明,完全没有挑衅和打击的意图哈  纯属个人观点  交流交流
用空白培养基当对照有时也可以的,但是要菌液的颜色和黏稠状态基本与空白菌液相同的时候才行,比如有些霉菌,如果菌液的状态已经完全改变,那么用空白培养基和用清水就没有太大的区别了,反正都不能把菌液中非菌体的吸光值给剔除掉,用清水可能还更好一点。
楼主可以把菌液离心一下,如果滤液和空白培养基OD值接近的话也可以用空白培养基当对照的,可以剔除掉培养基颜色对OD值的影响

[ Last edited by qijilaji on 2008-4-26 at 10:29 ]
10楼2008-04-26 10:24:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 helenfang 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见