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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » OD和菌量
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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helenfang

铜虫 (小有名气)

[交流] OD和菌量

请教各位：本人液体培养一种芽胞杆菌，培养基有颜色，因实验需要，希望通过OD值来判断菌量的多少，目前进行预实验，同时通过菌落计数来验证是否OD值真能反应菌量的多少，因这个菌会产荚膜，会导致培养基有点粘稠。最终结果似乎是不对应的，即有的菌液OD小但菌量还挺大的。
请问是不是培养基有颜色会导致OD 不能正确反应菌量的多少呢，另外OD值和菌体大小有关系吗，谢谢各位解答。。。
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1楼 2008-04-24 13:26:18
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qijilaji

金虫 (小有名气)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):虫友很热情,也很幽默, 希望别人误解你的意思
一般测OD值都是用来画生长曲线的，你想建立OD值和细胞密度的关系也不是不可以，但是估计误差会比较大，取样的均匀程度、培养液里的色素含量变化、培养基残渣都会产生误差。对于同一株菌来说，菌体大小对OD值的影响一般都不用考虑了，想得太复杂伤脑细胞
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2楼2008-04-24 14:45:14
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James685

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
菌液中很多因素能够影响OD值的，例如培养基残渣、死菌等，而平板计算出来的只是活菌数。
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3楼2008-04-24 15:15:55
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bulebird

金虫 (小有名气)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):积极交流奖
取一定量的菌液离心，用无菌水洗涤离心后重新悬浮，可消弱培养基颜色的影响。
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4楼2008-04-24 15:47:10
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helenfang

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by qijilaji at 2008-4-24 14:45:
一般测OD值都是用来画生长曲线的，你想建立OD值和细胞密度的关系也不是不可以，但是估计误差会比较大，取样的均匀程度、培养液里的色素含量变化、培养基残渣都会产生误差。对于同一株菌来说，菌体大小对OD值的影响 ...

我实验用的是同一属的芽孢杆菌，实验要求这几种菌的接入液体培养基中的接种量一致，我不知道应该用哪种方法比较方便快捷，尝试使用OD值的大小来判断菌量的多少，但我发现这几种菌菌体大小有些差异，好像有个菌体较小的菌OD很小但涂板计数后数量还是很多的，所以我在想是不是菌体大小会影响OD。
谢谢！
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5楼2008-04-24 20:51:42
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xiongxianghua

新虫 (初入文坛)
OD值与菌体大小是有关系的,如大肠杆菌与酵母一个OD值对应的细菌数就差一个数量级。另外OD值与平板计数是不能混为一谈的,因为OD值测量包括死菌,而平板上长出来的当然是活菌.另外别的因素也会影响,如OD值测量用600nm波长,在此波长有吸收的杂质如色素肯定会影响OD值与菌体量的对应关系。虽然活菌记数麻烦且不容易做好，但比较准确的还是活菌记数.
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6楼2008-04-25 11:25:46
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helenfang

铜虫 (小有名气)
楼上朋友说的非常好，非常感谢。那我想问下我有几种胶质芽胞杆菌（我想菌体大小应该不会相差太大吧），同时培养，同样的培养基，培养相同的时间测OD，我想这样测得的OD大小应该能大致反应菌量的多少关系吧。谢谢。。
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7楼2008-04-25 12:34:35
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rinp

木虫 (正式写手)
用没长菌培养基当空白对照不行吗
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海到无边天做岸山登绝顶我为峰.博士学位就是鞋里的一粒米，不拿不舒服，拿了不能吃！
8楼2008-04-25 12:50:02
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huangqihong

铁虫 (小有名气)
我最近经常测古菌Sto的OD值，我想OD值跟菌体大小、培养基（颜色、是否混浊等）等因素有关，当然测定时所选的光源波长也会影响OD值。测OD值时，一是以空白培养基作对照，二是注意温度（包括仪器温度和菌液温度）的控制，另外对该菌会产荚膜，是否考虑用稀释的方法。
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9楼2008-04-25 17:36:57
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qijilaji

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by rinp at 2008-4-25 12:50:
用没长菌培养基当空白对照不行吗

先申明，完全没有挑衅和打击的意图哈  纯属个人观点  交流交流
用空白培养基当对照有时也可以的，但是要菌液的颜色和黏稠状态基本与空白菌液相同的时候才行，比如有些霉菌，如果菌液的状态已经完全改变，那么用空白培养基和用清水就没有太大的区别了，反正都不能把菌液中非菌体的吸光值给剔除掉，用清水可能还更好一点。
楼主可以把菌液离心一下，如果滤液和空白培养基OD值接近的话也可以用空白培养基当对照的，可以剔除掉培养基颜色对OD值的影响

[ Last edited by qijilaji on 2008-4-26 at 10:29 ]
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10楼2008-04-26 10:24:36
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