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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 蛋白纯化
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flll2014

铜虫 (小有名气)

[求助] 蛋白纯化 已有5人参与

请问下我对蛋白质进行脱盐时用紫外检测有波峰，可是当跑蛋白泳时却什么都没有了，怎么回事？
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1楼 2014-09-18 09:00:41
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dongmings

木虫之王 (文学泰斗)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果你确定在电泳操作上没有问题的话，吸收峰可能是核酸吧
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2楼2014-09-18 09:03:45
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flll2014

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dongmings at 2014-09-18 09:03:45
如果你确定在电泳操作上没有问题的话，吸收峰可能是核酸吧

没问题的，因为有对照的，对照是有条带的，核酸吗，可是蛋白质中怎么会有核酸的呢
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3楼2014-09-18 12:11:52
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flll2014

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dongmings at 2014-09-18 09:03:45
如果你确定在电泳操作上没有问题的话，吸收峰可能是核酸吧

还有我用BCA 法测了浓度也是有浓度的
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4楼2014-09-18 12:29:30
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默一薰

铁虫 (小有名气)
★
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你测蛋白浓度了吗？会不会浓度太低了
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5楼2014-09-18 13:15:58
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dongmings

木虫之王 (文学泰斗)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by flll2014 at 2014-09-18 13:11:52
没问题的，因为有对照的，对照是有条带的，核酸吗，可是蛋白质中怎么会有核酸的呢...

你的蛋白是从细胞里提的吗？如果是，肯定有核酸
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6楼2014-09-18 13:28:35
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kuenyunliu

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
电泳染色检测绝对比测吸光靠谱，电泳没有基本就是没有
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7楼2014-09-18 20:42:17
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flll2014

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by dongmings at 2014-09-18 13:28:35
你的蛋白是从细胞里提的吗？如果是，肯定有核酸...

是原核表达的，纯化出来的蛋白质
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8楼2014-09-18 20:48:06
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flll2014

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 默一薰 at 2014-09-18 13:15:58
你测蛋白浓度了吗？会不会浓度太低了

测了，浓度是0.37mg/ml 不过R2有点低，才0.89
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9楼2014-09-18 20:49:09
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keke226

铁杆木虫 (正式写手)
★
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楼主用的什么脱盐柱？G25吗？
有许多物质会干扰BCA染色的，仔细检查一下溶液里的成分吧。紫外得吸收也可能是色素造成的。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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读书廿年倦写字，如今翻书不识志，若知眷书悔前程，无如渔樵未识时。三年担柴熟山性，三年苦网谙水汹，前程在心自倦舒，识志何用书中清。
10楼2014-09-18 21:23:15
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