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meiny

木虫 (职业作家)

应助: 5 (幼儿园)
金币: 14528.3
散金: 57
红花: 8
帖子: 4344
在线: 540.9小时
虫号: 444554
注册: 2007-10-27
专业: 样品前处理方法与技术

[交流] 请问HPLC出现肩峰的可能原因!

不知道为什么,最近做HPLC所出的峰都在后面出现一个肩峰,而此前同样的样品都只显示为一个峰的,浓度大的物质尤其严重,由于本人是刚入门做HPLC的,希望各位有经验的前辈们多指点一下吧?
难道是柱子塌陷了???
[search]肩峰[/search]

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1楼 2008-04-22 13:05:34

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

davidann

木虫 (知名作家)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 13431.9
红花: 4
帖子: 6858
在线: 590.5小时
虫号: 230769
注册: 2006-03-26
专业: 色谱分析

★ ★
dnp(金币+2,VIP+0):谢谢应助，请多多参与专家交流……^_^

最可能是滤片阻塞或者是柱头塌陷。

滤片正常工作的时候，流动相顺利地以基本平行的路径流过去。样品在这样的情况下进入柱子就能均匀分布地通过柱子前端并正常地流出柱子。但滤片被泵密封圈掉下来的或者没有过滤好的样品中的一小片微粒物部分堵塞了。堵塞会干扰柱头的流体曲线，造成注射进去的分子在另一部分样品之后到达柱子。这变形的流体曲线在色谱分离之前就发生了，所以变形会出现在后来通过柱子的每一个样品组分，结果每一个峰都有相似的外貌。

另外一个在柱头上引起峰变形的原因是填料塌陷。在某些情况下，塌陷显得像沉积的柱床；另外一些情况下则像填料中的蛀洞。后一种情况中，一些分子会像冲过通道一样比其他的分子更快地流过柱子的前端。同样的，变形发生在色谱分离之前，所以它以相似方式影响了每一个峰。