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张志敏1987铜虫 (初入文坛)
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[求助]
沙门氏菌总蛋白的提取！急需帮助！
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我的提取步骤： 1、将培养至对数生长期的细菌移至离心管，8000转离心15min； 2、用5%山梨醇重悬清洗4次； 3、按每20mg湿重菌体加500ul裂解液，超声裂解，超声条件300w，10s/10s，直至变清； 4、4度，18000转离心60min，取上清快速转到预冷的管中，置于-80度储存。 裂解液配方：尿素 4.2g 硫脲 1.52g CHAPS 0.4g 加水至10ml，溶解，分装成1ml，10管 临用前加入0.0098g/ml 的DTT 和蛋白酶抑制剂10ul/ml 请问我哪里不合适，导致蛋白质量不好，跑出二维电泳的图一直不好！ 请各位大侠指教，谢谢！  |
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张志敏1987
铜虫 (初入文坛)
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4楼2014-09-17 11:51:37
