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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 有大神在食用菌中克隆过蛋白酶么
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li245824369

木虫 (小有名气)

[求助] 有大神在食用菌中克隆过蛋白酶么 已有1人参与

提取RNA之后反转录再跑PCR电泳后无条带，是不是得诱导才能跑出片段啊？我用的是桦褐孔菌克隆蛋白酶。有没有懂的教教我，谢谢！
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1楼 2014-09-13 21:57:19
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bio_sci

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个基因有没有表达你都不清楚，就开始做卡

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2014-09-13 22:31:22
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li245824369

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bio_sci at 2014-09-13 22:31:22
这个基因有没有表达你都不清楚，就开始做卡

跑PCR不就是验证它表没表达么？没表达就得诱导啊，关键不知道怎么诱导~~~
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3楼2014-09-13 23:06:07
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dxh86412

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by li245824369 at 2014-09-13 23:06:07
跑PCR不就是验证它表没表达么？没表达就得诱导啊，关键不知道怎么诱导~~~...

话说，你的引物体系没问题吧~以前跑过没，确定以前能跑出来吗~
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4楼2014-09-13 23:11:28
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li245824369

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by dxh86412 at 2014-09-13 23:11:28
话说，你的引物体系没问题吧~以前跑过没，确定以前能跑出来吗~...

引物师兄帮设计的，之前的都能跑出来。
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5楼2014-09-14 09:26:44
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fuchange918

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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li245824369: 金币+10, ★★★★★最佳答案, OK 2014-09-14 18:52:31
用金属离子诱导一下试试看，诱导10天左右。如果是酸性/碱性蛋白酶，培养基的PH调节为相应的PH值。
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6楼2014-09-14 18:47:50
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