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丹604859039

银虫 (初入文坛)

[求助] 液质联用测定蛋白质 已有3人参与

我想用液质联用分析蛋白质样品。想求助各位大神测定前样品前处理的具体步骤。还有,液质联用测定蛋白质的程序。。谢谢谢谢!!!
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
测定蛋白质难度较大,比较简单的是MALDI-TOF,如果使用ESI的话,虽然会形成多电荷离子,但是还是需要估算分子量是否超出测定范围。其次就是有机相不能太多,否则可能会造成蛋白变性或者沉淀而损害仪器或者色谱柱。最后就是样品最好纯化,充分考虑基质效应
2楼2014-09-11 11:39:21
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丹604859039

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wyy080214 at 2014-09-11 11:39:21
测定蛋白质难度较大,比较简单的是MALDI-TOF,如果使用ESI的话,虽然会形成多电荷离子,但是还是需要估算分子量是否超出测定范围。其次就是有机相不能太多,否则可能会造成蛋白变性或者沉淀而损害仪器或者色谱柱。最 ...

谢谢,但是我还是想知道前处理的具体步骤和测定蛋白质的程序。
3楼2014-09-11 14:09:07
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JLU_chem_man

新虫 (正式写手)

质谱蛋白质学习者

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
测定还是鉴定,定量还是定性?定量需要有标准品以及itraq技术,定性,你需要酶解LC-MS/.MS,maldi-tof-MS/MS,细节百度。
努力奋斗!!!
4楼2014-09-12 09:44:26
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丹604859039

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by JLU_chem_man at 2014-09-12 09:44:26
测定还是鉴定,定量还是定性?定量需要有标准品以及itraq技术,定性,你需要酶解LC-MS/.MS,maldi-tof-MS/MS,细节百度。

谢谢,我是做定性。
5楼2014-09-17 08:09:41
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馒头爱生物

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

是moldi还是ESI高分辨?是较纯的蛋白还是复杂蛋白混合物?
不知道你是主要做蛋白的,还是主攻质谱,液相的,说的详细点,要不不知道重点和你强调哪方面知识
6楼2014-09-30 14:48:31
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