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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 质谱分析 » 液质联用测定蛋白质
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丹604859039

银虫 (初入文坛)

[求助] 液质联用测定蛋白质 已有3人参与

我想用液质联用分析蛋白质样品。想求助各位大神测定前样品前处理的具体步骤。还有，液质联用测定蛋白质的程序。。谢谢谢谢！！！
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1楼 2014-09-11 09:15:36
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
测定蛋白质难度较大，比较简单的是MALDI-TOF，如果使用ESI的话，虽然会形成多电荷离子，但是还是需要估算分子量是否超出测定范围。其次就是有机相不能太多，否则可能会造成蛋白变性或者沉淀而损害仪器或者色谱柱。最后就是样品最好纯化，充分考虑基质效应
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2楼2014-09-11 11:39:21
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丹604859039

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wyy080214 at 2014-09-11 11:39:21
测定蛋白质难度较大，比较简单的是MALDI-TOF，如果使用ESI的话，虽然会形成多电荷离子，但是还是需要估算分子量是否超出测定范围。其次就是有机相不能太多，否则可能会造成蛋白变性或者沉淀而损害仪器或者色谱柱。最 ...

谢谢，但是我还是想知道前处理的具体步骤和测定蛋白质的程序。
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3楼2014-09-11 14:09:07
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JLU_chem_man

新虫 (正式写手)

质谱蛋白质学习者

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
测定还是鉴定，定量还是定性？定量需要有标准品以及itraq技术，定性，你需要酶解LC-MS/.MS，maldi-tof-MS/MS，细节百度。
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努力奋斗！！！
4楼2014-09-12 09:44:26
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丹604859039

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by JLU_chem_man at 2014-09-12 09:44:26
测定还是鉴定，定量还是定性？定量需要有标准品以及itraq技术，定性，你需要酶解LC-MS/.MS，maldi-tof-MS/MS，细节百度。

谢谢，我是做定性。
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5楼2014-09-17 08:09:41
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馒头爱生物

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

是moldi还是ESI高分辨？是较纯的蛋白还是复杂蛋白混合物？
不知道你是主要做蛋白的，还是主攻质谱，液相的，说的详细点，要不不知道重点和你强调哪方面知识
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6楼2014-09-30 14:48:31
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