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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 重组蛋白在BL21(DE3)中表达，存在包涵体
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by liuxiuaza at 2014-12-01 12:06:09
最好不要这样，我都是划线培养个板子，每次挑一个单克隆至5mL LB培养基中，先摇16个小时活化，然后拿活化的菌液接种，再诱导...

那这样怎么保证每次的最高酶活都差不多呢？而且划了板子不久相当于传代了么
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11楼2014-12-02 11:49:40
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zcg0216

银虫 (初入文坛)
那长期保藏怎么办

发自小木虫Android客户端
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12楼2017-06-24 09:44:50
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寻一束光

铁虫 (小有名气)
楼主您好，请问您的问题后来怎么解决的，我也是遇到同样的问题，刚开始做是在上清的，沉淀里没有蛋白，还纯化过一次，后面重新转化了一次，就变成包涵体了，条件是一样的，都是0.5mM IPTG,18℃，诱导20h,然后我又尝试改了表达条件，0.1mM IPTG，16℃，诱导5h,10h,18h,还是都是包涵体，不明白为什么，而且收菌的时候还发现超纯水能使菌破裂，变得黏糊糊的~做了好久了，心累啊~
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静心尽力
13楼2018-10-26 14:38:34
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