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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by liuxiuaza at 2014-12-01 12:06:09
最好不要这样,我都是划线培养个板子,每次挑一个单克隆至5mL LB培养基中,先摇16个小时活化,然后拿活化的菌液接种,再诱导...

那这样怎么保证每次的最高酶活都差不多呢?而且划了板子不久相当于传代了么
11楼2014-12-02 11:49:40
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zcg0216

银虫 (初入文坛)

12楼2017-06-24 09:44:50
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寻一束光

铁虫 (小有名气)

楼主您好,请问您的问题后来怎么解决的,我也是遇到同样的问题,刚开始做是在上清的,沉淀里没有蛋白,还纯化过一次,后面重新转化了一次,就变成包涵体了,条件是一样的,都是0.5mM IPTG,18℃,诱导20h,然后我又尝试改了表达条件,0.1mM IPTG,16℃,诱导5h,10h,18h,还是都是包涵体,不明白为什么,而且收菌的时候还发现超纯水能使菌破裂,变得黏糊糊的~做了好久了,心累啊~
静心尽力
13楼2018-10-26 14:38:34
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