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raohuihua

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by zeroon at 2014-09-05 23:01:31
第一,检查酶切位点是否正确,一定要有和别人给的质粒对应的序列图谱。
第二,所提质粒酶切用了多少微升,多少纳克的量?是不是太少了?
第三,酶切了多久?酶切温度和说明书上的一致吗?
第四,反复对照检查实验 ...

图谱是有的,酶切位点也是对的,温度也看了没错,酶切体系:质粒4ul,单酶1ul,buffer1ul,ddw4ul,37°C 40min,多少纳克不清楚,就是依据图片上的亮度估计的,然后切完后加了8ul进去跑电泳,酶切已经做了很多次了,应该不存在加样的问题
11楼2014-09-06 09:53:22
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by raohuihua at 2014-09-06 09:48:05
单酶切和双酶切都试过了,用原始的质粒也做了阳性对照,原始的质粒切出来了,其它的都没有...

阳性对照有电泳图吗?我的意思是你换个其他内切酶试试。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
12楼2014-09-06 10:23:07
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miaoshuang

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
试剂盒是不是有问题?换一个试试
努力,勇敢向前走,一切皆有可能
13楼2014-09-08 11:10:09
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