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木虫 (小有名气)

[求助] 质粒的双酶切位点切不开是为什么?怎么办呢?切不开载体质粒不能实现重组。。 已有6人参与

质粒的双酶切位点切不开是为什么?怎么办呢?切不开载体质粒不能实现重组。。。
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1151529259

木虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by Virove at 2014-09-08 01:29:05
一种可能是两个酶切位点可能距离太近,不足以容纳两种内切酶之间的物理距离;还有一种可能是你选择酶切的位点是甲基化的位点,内切酶无法发挥作用。

距离应该不是问题。请问一下物理距离是多少呢?
  
我不知道酶切位点是不是甲基化位点,怎么确定?

谢谢大神帮忙。。。
11楼2014-09-12 14:37:50
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zero19871029

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
切不开的原因太多了~你用的是哪个公司的内切酶?酶切时间是否合适
2楼2014-09-05 17:36:52
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1151529259

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zero19871029 at 2014-09-05 17:36:52
切不开的原因太多了~你用的是哪个公司的内切酶?酶切时间是否合适

Takara 公司的内切酶,酶切了3h
3楼2014-09-05 20:43:08
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ncuduhan

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
问题的陈述太简单了,你要简单的说一下你的质粒,实验的protocol,这样我们才能帮你发现问题

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-09-07 23:06:38
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