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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 连接转化问题
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生物小学渣

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by hj890509 at 2014-10-08 08:40:52
体系就按说明书里的，我用的是NEB的酶，用Cutsmart缓冲液，不需要加0.1%的BSA，酶切两个小时就够了...

谢谢回复，但是您说的NEB不是连接酶吗？我想做酶切，不是连接。因为两种酶带的Buffer不一样，所以我不会酶切。您说的用同种酶从T载上切下来，我没太明白
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11楼2014-10-09 10:03:59
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生物小学渣

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by hj890509 at 2014-10-08 08:40:52
体系就按说明书里的，我用的是NEB的酶，用Cutsmart缓冲液，不需要加0.1%的BSA，酶切两个小时就够了...

不好意思，我刚刚查了您说的NEB酶，原来我们用的是不同公司的酶，我买的是宝生物的酶。可能不太一样，我在找找，学习学习。谢谢您的回复
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12楼2014-10-09 10:11:55
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
hj890509: 金币+2, ★有帮助, 谢谢 2014-10-10 09:53:18
内容已删除
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13楼2014-10-09 19:47:02
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五维度的爱

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
hj890509: 金币+4, ★★★很有帮助, 谢谢 2014-10-10 09:53:28
我们一般连接用16度，连接时间的长短没太大影响，我们做过连接过夜，也做过连接半个小时的
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14楼2014-10-09 22:11:36
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