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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » anti-GFP抗体能识别YFP吗
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zjwang

木虫 (正式写手)

[求助] anti-GFP抗体能识别YFP吗 已有4人参与

如题，好像很少能买到anti-YFP抗体，但是GFP的抗体能很好的识别YFP吗？因为能看到YFP荧光，但是用ANTI-GFP抗体杂不出来，是不是抗体的原因？
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1楼 2014-09-02 10:42:32
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ahhngwj

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-09-02 15:38:25
zjwang: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢 2014-09-02 16:52:32
一般来说是可以的吧，反正我们实验室的就可以。你可以打电话到买抗体的公司，问问技术支持
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2楼2014-09-02 13:47:53
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Edenberry

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
找找 YFP抗体还是有很多生物公司卖的吧，我这就有。
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3楼2014-09-02 17:51:57
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zjwang

木虫 (正式写手)
你是公司的？
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4楼2014-09-03 10:42:57
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lxz_119

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zjwang: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢 2014-09-04 11:51:16
YFP相对于GFP来说只突变了几个氨基酸而已，所以GFP的抗体是可以识别YFP的，至少我们实验室一直这么做！
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5楼2014-09-04 09:30:10
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zjwang

木虫 (正式写手)
但是很多能看到荧光的用抗体却检测不出来，不知道怎么回事
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6楼2014-09-04 11:51:00
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sun_in_night

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zjwang: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-09-09 15:07:01
一般GFP抗体是可以测YFP的。我之前也碰到过能看到荧光但western做不出来，后来发现是蛋白相对较大，半湿转效率不高。优化了转膜条件之后就很好检测了。不知道你会不会也是western的条件对你检测的蛋白不是最佳的呢？
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7楼2014-09-05 06:27:33
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zjwang

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by sun_in_night at 2014-09-05 06:27:33
一般GFP抗体是可以测YFP的。我之前也碰到过能看到荧光但western做不出来，后来发现是蛋白相对较大，半湿转效率不高。优化了转膜条件之后就很好检测了。不知道你会不会也是western的条件对你检测的蛋白不是最佳的呢？

我是半干转印，蛋白分子量确实挺大的，但是从MARKER看，应该是转过去了
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8楼2014-09-09 15:08:02
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sun_in_night

木虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by zjwang at 2014-09-08 19:08:02
我是半干转印，蛋白分子量确实挺大的，但是从MARKER看，应该是转过去了...

marker 量比较高，所以膜上看起好像很明显。其实可以对比一下page上的marker的颜色，我一般都能转到page上的颜色一点都没有。我用20-30v，4度，过夜转。PVDF膜可能会更好
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9楼2014-09-10 21:14:00
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