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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 琼脂糖电泳
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禁锢挽歌

新虫 (初入文坛)

[求助] 琼脂糖电泳 已有4人参与

有人做过大概10K左右的人类基因组扩增产物的琼脂糖电泳吗？第一次做这种，没有什么经验，希望做过的能给个建议，非常感谢。
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1楼 2014-09-01 12:01:06
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wangranjun

荣誉版主 (知名作家)

广庭之惘然

优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
片段好大呀，若要跑胶的话最好用高浓度的琼脂糖，低电压。我只做过6Kb左右的片段……
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他日扬翼九万里，历大千世界，定我红尘心！
2楼2014-09-01 19:14:31
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禁锢挽歌

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wangranjun at 2014-09-01 19:14:31
片段好大呀，若要跑胶的话最好用高浓度的琼脂糖，低电压。我只做过6Kb左右的片段……

我做的是基因组的  我看有人建议是用0.7%的胶  电压低 公司的电泳仪是简易的，只有50和100v的电压 ，跑了一次都是弥散的
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3楼2014-09-02 16:12:57
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111111111118

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-09-03 18:54:01
10k不是很大吧， 有的DNA mark 的最大条带就是10k。
一般0.8%的胶就能跑开。 多跑一会， 把蓝色的前沿跑出去。
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4楼2014-09-02 16:21:39
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chuxuan

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验！ 2014-09-03 18:54:13
亲，10K不大吧，我还搞整个基因组呢，上百K。。。0.7%的胶  电压低  过夜跑。我天天这么干。。。干了一个月。。提基因组，构建基因组文库。
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5楼2014-09-02 16:32:44
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youlizujuan

新虫 (小有名气)
大片段 低浓度
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6楼2014-09-03 18:44:03
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Restarter

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by wangranjun at 2014-09-01 19:14:31
片段好大呀，若要跑胶的话最好用高浓度的琼脂糖，低电压。我只做过6Kb左右的片段……

片段大的话不是应该用浓度小点的胶吗，否则按照你的低电压的话，那不是要很久去了。
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7楼2014-10-09 21:52:36
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