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有关GE的HiTrap DEAE FF的使用问题 已有1人参与
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各位纯化方面的大侠，想请教一些关于HiTrap DEAE FF预装柱（1ml）的一些使用问题 最近在摸索一混合蛋白的纯化 1. 用了HiTrap DEAE FF，先选择一根新的小柱，发现洗脱峰只有一个，而用Q柱能分到3个峰，是否证明Q柱更适合这种样品？ 2. 对HiTrap DEAE FF进行第二次试验的时候发现小柱好像进气泡了，无论是压力还是电导等参数都呈现不稳定的状态，我想问一下这种预装柱进了气泡是否只能报废，有没有补救的方法？ 3. 由于小柱进气泡，我就新开了一支HiTrap DEAE FF，但是发现这根柱子的紫外吸收有异常，用平衡液平衡了好久依旧回不到基线，用含有1MNaCl的B洗脱，出现很多尖锐的洗脱峰，紫外吸收的数值变化范围大且快，最后用100%B后回到100%A依旧是洗不回基线，这是一根新柱，不知道问题出哪了？难道要用NaOH原位清洗的方法？ 这几个问题一直困扰我，希望大家踊跃解答，不甚感激！ |
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