24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 919  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

小政搞科研

新虫 (初入文坛)

[求助] DEAE - sephadex A -50 急求处理方法和试验中遇到问题的解决办法 已有1人参与

刚购置了19g瑞典进口的DEAE-sephadex A -50,直接用1L蒸馏水和19g胶粒混合,发现迅速溶胀成极其黏稠的胶体,随即再加入大量蒸馏水。然后与0.02M的Tris-Hcl在沸水中热胀。装住过程中发现凝胶悬浮液在缓冲液中沉降速度好慢,平衡更是慢,一般需要平衡12个小时左右。加样:样液在柱床上沉积的好慢,基本不会和柱床融合。急求各位大神此胶的处理方法和做过此类层析的大神指导点拨。拜谢!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小政搞科研

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 帖航 at 2014-09-05 09:43:56
如果想得到具体的建议,你需要提供,你蛋白的性质(等电点,分子量),缓冲液成分(离子强度及pH,这个很重要),柱床尺寸,流速,运行温度,上样量等,数据越全越好,你说一个没有峰没法给你建议。如果基线一直是 ...

蛋白质的性质不清楚,分子量大概是50KD,缓冲液是PH为6.8的Tris-Hcl缓冲液,柱床是40*1,流速是0.3ml/min,温度是室温,上样量比较随意,大约是柱床的十分之一。这两天有事,回复的晚了,抱歉
6楼2014-09-09 10:36:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

帖航

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小政搞科研: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2014-09-04 17:31:16
首先新买的填料,溶胀后要用酸碱共洗的,19g胶粒要用2L蒸馏水溶胀。还有看你所述你应该用的是常规的低压层析吧,如果是AKTA增加压力就可以了。
2楼2014-09-01 08:23:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小政搞科研

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 帖航 at 2014-09-01 08:23:58
首先新买的填料,溶胀后要用酸碱共洗的,19g胶粒要用2L蒸馏水溶胀。还有看你所述你应该用的是常规的低压层析吧,如果是AKTA增加压力就可以了。

谢谢大神的回复。我们后来加了很多水溶胀,发现太稀就用水浴煮沸把水蒸干。后来加了tris就上柱了。我们的是上海沪西厂生产的柱层析装置,应该就是您说的低压层析。这几天一直做,一次也没出过峰,好郁闷。
3楼2014-09-04 17:30:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

帖航

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小政搞科研 at 2014-09-04 17:30:45
谢谢大神的回复。我们后来加了很多水溶胀,发现太稀就用水浴煮沸把水蒸干。后来加了tris就上柱了。我们的是上海沪西厂生产的柱层析装置,应该就是您说的低压层析。这几天一直做,一次也没出过峰,好郁闷。...

如果想得到具体的建议,你需要提供,你蛋白的性质(等电点,分子量),缓冲液成分(离子强度及pH,这个很重要),柱床尺寸,流速,运行温度,上样量等,数据越全越好,你说一个没有峰没法给你建议。如果基线一直是平的,建议你用其他蛋白试试,看看有没有峰。
4楼2014-09-05 09:43:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿南开大学0710生物学359求调剂 +3 兔兔兔111223314 2026-03-29 3/150 2026-03-29 23:14 by Evan_Liu
[考研] 一志愿武汉理工,总分321,英一数二,求老师收留。 +11 nnnnnnn5 2026-03-25 11/550 2026-03-29 20:42 by 无际的草原
[考研] 085600 材料与化工 329分求调剂 +14 Mr. Z 2026-03-25 14/700 2026-03-29 17:27 by 学员8dgXkO
[考研] 289求调剂 +5 BrightLL 2026-03-29 5/250 2026-03-29 17:24 by zhyzzh
[考研] 调剂考研 +3 王杰一 2026-03-29 3/150 2026-03-29 08:09 by fmesaito
[考研] 085701求调剂初试286分 +4 secret0328 2026-03-28 4/200 2026-03-28 21:09 by 15366876211
[考研] 311(085601)求调剂 +4 liziyeyeye 2026-03-28 4/200 2026-03-28 18:50 by 535743368
[考研] 一志愿华北电力大学能动专硕,293,求调剂 +3 15537177284 2026-03-23 5/250 2026-03-28 16:11 by xxxsssccc
[考研] 283求调剂 +3 A child 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:41 by ms629
[考研] 0703一志愿9,初试成绩:338,四六级已过,有科研经历,求调剂! +4 Zuhui0306 2026-03-25 4/200 2026-03-28 13:07 by 唐沐儿
[考研] 070300求调剂306分 +4 26要上岸 2026-03-27 4/200 2026-03-28 13:06 by 唐沐儿
[考研] 291求调剂 +6 HanBeiNingZC 2026-03-24 6/300 2026-03-28 07:55 by baoball
[考研] 328求调剂 +7 嗯滴的基本都 2026-03-27 7/350 2026-03-28 04:19 by fmesaito
[考研] 272求调剂 +7 脚滑的守法公民 2026-03-27 7/350 2026-03-27 17:23 by laoshidan
[考研] 286求调剂 +4 lim0922 2026-03-26 4/200 2026-03-27 10:28 by guoweigw
[考研] 一志愿河工大 081700 276求调剂 +4 地球绕着太阳转 2026-03-23 4/200 2026-03-26 14:27 by zzll406
[考研] 各位老师您好:本人初试372分 +5 jj涌77 2026-03-25 6/300 2026-03-25 14:15 by mapenggao
[考研] 277分求调剂,跨调材料 +3 考研调剂lxh 2026-03-24 3/150 2026-03-24 13:52 by JourneyLucky
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
[考研] 284求调剂 +3 yanzhixue111 2026-03-23 6/300 2026-03-23 22:58 by pswait
信息提示
请填处理意见