24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 918  |  回复: 5

小政搞科研

新虫 (初入文坛)

[求助] DEAE - sephadex A -50 急求处理方法和试验中遇到问题的解决办法 已有1人参与

刚购置了19g瑞典进口的DEAE-sephadex A -50,直接用1L蒸馏水和19g胶粒混合,发现迅速溶胀成极其黏稠的胶体,随即再加入大量蒸馏水。然后与0.02M的Tris-Hcl在沸水中热胀。装住过程中发现凝胶悬浮液在缓冲液中沉降速度好慢,平衡更是慢,一般需要平衡12个小时左右。加样:样液在柱床上沉积的好慢,基本不会和柱床融合。急求各位大神此胶的处理方法和做过此类层析的大神指导点拨。拜谢!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

帖航

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小政搞科研: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2014-09-04 17:31:16
首先新买的填料,溶胀后要用酸碱共洗的,19g胶粒要用2L蒸馏水溶胀。还有看你所述你应该用的是常规的低压层析吧,如果是AKTA增加压力就可以了。
2楼2014-09-01 08:23:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小政搞科研

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 帖航 at 2014-09-01 08:23:58
首先新买的填料,溶胀后要用酸碱共洗的,19g胶粒要用2L蒸馏水溶胀。还有看你所述你应该用的是常规的低压层析吧,如果是AKTA增加压力就可以了。

谢谢大神的回复。我们后来加了很多水溶胀,发现太稀就用水浴煮沸把水蒸干。后来加了tris就上柱了。我们的是上海沪西厂生产的柱层析装置,应该就是您说的低压层析。这几天一直做,一次也没出过峰,好郁闷。
3楼2014-09-04 17:30:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

帖航

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小政搞科研 at 2014-09-04 17:30:45
谢谢大神的回复。我们后来加了很多水溶胀,发现太稀就用水浴煮沸把水蒸干。后来加了tris就上柱了。我们的是上海沪西厂生产的柱层析装置,应该就是您说的低压层析。这几天一直做,一次也没出过峰,好郁闷。...

如果想得到具体的建议,你需要提供,你蛋白的性质(等电点,分子量),缓冲液成分(离子强度及pH,这个很重要),柱床尺寸,流速,运行温度,上样量等,数据越全越好,你说一个没有峰没法给你建议。如果基线一直是平的,建议你用其他蛋白试试,看看有没有峰。
4楼2014-09-05 09:43:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

帖航

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小政搞科研 at 2014-09-04 17:30:45
谢谢大神的回复。我们后来加了很多水溶胀,发现太稀就用水浴煮沸把水蒸干。后来加了tris就上柱了。我们的是上海沪西厂生产的柱层析装置,应该就是您说的低压层析。这几天一直做,一次也没出过峰,好郁闷。...

还有,水多了就把胶粒沉淀下去把水倒掉,凝胶一般是不能煮沸的,容易破损,加热溶胀也是加热到80度的,煮沸这个太危险
5楼2014-09-05 09:46:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小政搞科研

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 帖航 at 2014-09-05 09:43:56
如果想得到具体的建议,你需要提供,你蛋白的性质(等电点,分子量),缓冲液成分(离子强度及pH,这个很重要),柱床尺寸,流速,运行温度,上样量等,数据越全越好,你说一个没有峰没法给你建议。如果基线一直是 ...

蛋白质的性质不清楚,分子量大概是50KD,缓冲液是PH为6.8的Tris-Hcl缓冲液,柱床是40*1,流速是0.3ml/min,温度是室温,上样量比较随意,大约是柱床的十分之一。这两天有事,回复的晚了,抱歉
6楼2014-09-09 10:36:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小政搞科研 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 26申博自荐 +6 whh869393 2026-03-24 6/300 2026-03-29 21:05 by nxgogo
[考研] 材料科学与工程求调剂 +6 深V宿舍吧 2026-03-29 6/300 2026-03-29 20:51 by 唐沐儿
[考研] 275求调剂 +15 Micky11223 2026-03-25 20/1000 2026-03-29 20:44 by 唐沐儿
[考研] 291求调剂 +7 Y-cap 2026-03-29 8/400 2026-03-29 19:53 by klasasda
[考研] 求调剂 +4 青春裁为三截 2026-03-29 4/200 2026-03-29 15:01 by 唐沐儿
[考研] 085701求调剂初试286分 +4 secret0328 2026-03-28 4/200 2026-03-28 21:09 by 15366876211
[考研] 085701环境工程,267求调剂 +16 minht 2026-03-26 16/800 2026-03-28 12:16 by zllcz
[考研] 药学105500求调剂 +3 Ssun。。 2026-03-28 3/150 2026-03-28 11:24 by lxf170613
[考研] 330一志愿中国海洋大学 化学工程 085602 有读博意愿 求调剂 +3 wywy.. 2026-03-27 4/200 2026-03-28 03:32 by fmesaito
[考研] 0703化学求调剂,各位老师看看我!!! +5 祁祺祺 2026-03-25 5/250 2026-03-27 21:44 by 东方猪猪
[考研] 265求调剂11408 +3 刘小鹿lu 2026-03-27 3/150 2026-03-27 20:53 by nihaoar
[考研] 348求调剂 +4 小懒虫不懒了 2026-03-27 5/250 2026-03-27 12:47 by 果果妈咪
[考研] 324求调剂 +5 hanamiko 2026-03-26 5/250 2026-03-27 10:33 by wangjy2002
[考研] 325求调剂 +5 李嘉图·S·路 2026-03-23 5/250 2026-03-27 00:42 by wxiongid
[考研] 336材料求调剂 +7 陈滢莹 2026-03-26 9/450 2026-03-27 00:20 by wxiongid
[考研] 生物学 296 求调剂 +4 朵朵- 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:01 by 不吃魚的貓
[考研] 调剂 +4 13853210211 2026-03-24 4/200 2026-03-24 19:44 by ms629
[考研] 化工专硕求调剂 +3 question挽风 2026-03-24 3/150 2026-03-24 18:48 by jhhcooi
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
[考研] 求老师收我 +3 zzh16938784 2026-03-23 3/150 2026-03-23 12:56 by ztnimte
信息提示
请填处理意见