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ShawRr

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] co-ip的样品拿去做iTRAQ需要什么处理 已有1人参与

请教大神:我的样品是通过免疫共沉淀(co-ip)得到的,最后一步是用loading buffer煮,所以样品里含有IgG和loading buffer,想问一下大神这样的样品去做iTRAQ需要怎么处理,如何去除IgG,如何除盐?
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ShawRr

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by woodsen at 2014-08-27 10:32:19
含有IgG 倒还好,但是你为什么用loading buffer 煮呢,我在做iTRAQ的时候是按照检测公司的要求进行处理的,提取全蛋白主要是用尿素和SDS进行蛋白变性处理即可。

就是电泳上样缓冲溶液,成分 Tris•Hcl,甘油,SDS,β-巯基乙醇,溴酚蓝。
我做co-ip的磁珠说明书上这么要求的。
3楼2014-08-27 11:52:05
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woodsen

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
含有IgG 倒还好,但是你为什么用loading buffer 煮呢,我在做iTRAQ的时候是按照检测公司的要求进行处理的,提取全蛋白主要是用尿素和SDS进行蛋白变性处理即可。
2楼2014-08-27 10:32:19
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