9楼: Originally posted by 1020490511 at 2014-09-04 10:49:09
问一下楼主，你用的A液和B液分别是什么？我的重组his标签蛋白挂不上柱子，不知原因。谢谢！

5楼: Originally posted by flll2014 at 2014-09-02 20:52:48
纯化标签和目的蛋白之间本来就有酶切位点，我是直接拿酶去切his标签的，切完之后，重新挂柱，正常的应该是标签挂柱，目的蛋白流穿，但是现在的情况是标签和蛋白都结合在柱子上了。用高浓度咪唑洗脱后既有标签又有目 ...

11楼: Originally posted by 璧月 at 2014-09-04 12:23:37
我们这里也遇到过不挂柱的问题，不过拿出菌种重新做又好了，估计是因为菌种退化。
菌种退化不止是有不挂柱的情况，还会出现蛋白没活性的情况，这些还需要注意。...

12楼: Originally posted by 璧月 at 2014-09-04 12:30:25
既然目的蛋白没有流穿，那就低浓度洗目的蛋白，高浓度洗标签呗...

13楼: Originally posted by flll2014 at 2014-09-04 13:05:32
菌种退化什么意思...

13楼: Originally posted by flll2014 at 2014-09-04 13:05:32
菌种退化什么意思...

11楼: Originally posted by 璧月 at 2014-09-04 12:23:37
我们这里也遇到过不挂柱的问题，不过拿出菌种重新做又好了，估计是因为菌种退化。
菌种退化不止是有不挂柱的情况，还会出现蛋白没活性的情况，这些还需要注意。...