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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 测序结果
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hajierlove

铜虫 (正式写手)

[求助] 测序结果 已有1人参与

测序结果ATG后面总是出现一两个碱基，是什么原因，是不是我第一步pcr胶回收的都有问题？亲们，求解
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踏实
1楼 2014-08-24 17:41:59
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huyan0817

木虫 (正式写手)
楼主 你把问题描述清楚一点！
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2楼2014-08-24 22:23:01
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hajierlove

铜虫 (正式写手)
就是ORF序列ATG起始的后面就插入了5个碱基，后面的序列比对完全一样。测了两次都是这样的
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踏实
3楼2014-08-25 10:21:42
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令狐少陈

铜虫 (小有名气)
是不是你的引物从orf开头设计的，引物带进去的？或者你的参考序列是网上的，和你的样本相比是个体突变差异？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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多多交流，海纳百川
4楼2014-08-28 00:36:07
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huyan0817

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
hajierlove(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-28 21:58:53
引用回帖:
3楼: Originally posted by hajierlove at 2014-08-25 10:21:42
就是ORF序列ATG起始的后面就插入了5个碱基，后面的序列比对完全一样。测了两次都是这样的

这个的原因很多,很有可能是PCR时候出问题了，胶回收一般不会出问题！建议楼主P完后先连接到T载体，再连接到表达载体！
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5楼2014-08-28 12:49:39
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