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smile901018

金虫 (小有名气)

[求助] 抑菌试验 已有4人参与

我现在得到了一株霉菌的发酵液的乙酸乙酯萃取物,准备做活性测试,对一些病原真菌和一些细菌(如大肠杆菌)。
        我采用的是滤纸片法,就是将供试菌株做成带菌平板,平板上再放带药滤纸片。问题就是病原真菌我全部在PDA平板上培养的,基本上不产孢子,根本没法用孢子液涂板,所以我就用发酵液用纱布过滤掉菌丝再涂板或者加到平板中都试过,结果平板上什么都没长(时间已等得够久了),这正常吗?各位大侠有没有什么更好的方法?
        另外我开始在中间放病原真菌菌饼,四周放滤纸片测试我的萃取物有点活性,但是做大肠杆菌的抑菌活性竟然没有抑菌圈,平板上放了带药滤纸片,这正常吗?不是说抑制大肠杆菌什么的最容易吗,怎么我这就不行了,难道说板上菌涂多了(100uL)?
        还有我不用菌饼放中间,滤纸片放旁边的方法是因为没有完整的抑菌圈,不能把抑菌活性量化,所以这个方法我就放弃了。如果各位大侠有什么更好的可以量化抑菌活性的办法那就请多多赐教(最好是关于真菌的活性测试),谢谢,不胜感激!
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jilabusha

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
smile901018: 金币+2, 有帮助 2014-08-26 15:54:18
一,很可能你这东西对大肠杆菌本来就没有抗性;二,那个没有完整抑菌圈,有可能是你的培养时间不够,再久培养一点;另外你也可以加大你的试药浓度啊!

[ 发自小木虫客户端 ]
天道酬勤
2楼2014-08-22 23:26:59
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pipwang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

用牛津杯法吧,提取物难溶的话可以用低浓度的DMSO溶解
3楼2014-08-28 11:22:08
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Mabel k

木虫 (正式写手)

你可以用牛津杯试试,它的抑菌圈比滤纸片的好些。最近我也在做真菌的抑菌试验,可以交流一下
生存下来的物种并不是最强壮的,也不是最聪明的,而是最能适应变化的。
4楼2016-05-06 16:03:27
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斌Joker

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

真菌的抑菌实验可以直接用带毒平板上接种真菌的菌饼,三天后观察菌饼的长势,不就做到了 真菌的抑菌试验了吗?
5楼2016-05-06 19:49:19
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danjianbaoz

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

牛津杯法要先将菌培养一段时间后加药,还是平板凝固后直接加药
6楼2019-06-04 20:04:53
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