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baoyu166

禁虫 (初入文坛)

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1楼2014-08-20 10:46:37

已阅关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

应助: 183 (高中生)
金币: 3100.2
散金: 19
红花: 12
帖子: 1427
在线: 186.8小时
虫号: 2538789
注册: 2013-07-09
专业: 生物物理、生物化学与分子

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
baoyu166: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-08-21 10:26:28
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-08-21 18:04:12

如果双酶切完全了载体不与片段连接按理不会有单克隆，但实际上可能会长几个的，因为菌有自身修复的作用。
你切下的片段太小的话，就一个一个进行单酶切，确保第一个完全酶切后，乙醇沉淀回收在进行第二个酶切。
连接的时候做个载体+水，载体+片段两个，载体+水作对照。
如果载体+水长的比载体+片段明显少，那就挑了。
如果二者相差无几，那就重切载体。