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莫伊2013

银虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by bwangel at 2014-08-19 13:53:04
你这个是多少大的marker啊,100bp的带,用500的marker跑,100V,2%的胶,记得胶溶的彻底点,怎么样都能跑出来,别用你那个marker了,

好的 我再试试
11楼2014-08-19 14:44:50
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
莫伊2013: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-08-20 09:20:12
可以试下90V,30min。你制胶不要按次数溶解,只要沸腾了就拿出来晃晃,直至溶解完全。倒胶不宜太热,也不宜太凉,这个只要稍微烫手就可以倒了。
12楼2014-08-19 14:51:56
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莫伊2013

银虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by wangranjun at 2014-08-19 12:46:33
电压降一下,降到100V,电压高的话可能会这样子的。TAE都是最近配的吗?...

还是不行啊,是不是我上样量太多了 我点了5微升。怎么搞的啊,配的TAE应该没问题的
PCR电泳总是跑成狗骨头的样子,求大神帮忙找找原因哦
Administrator 2014-08-19 16 时 38 分.jpg

13楼2014-08-19 16:44:25
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

marker一般点个3uL就差不多了,这个胶图跑得还可以啊
植根于内心的修养;无需提醒的自觉;以约束为前提的自由;为别人着想的善良
14楼2014-08-19 16:58:12
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杨仔

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
莫伊2013(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-19 19:25:30
狗骨头样子其实不影响实验的啦。你应该是从孔中间加的样,loading密度大,惯性下沉把样品挤到两边,so……。样品适度稀释一下,加样时枪头捅下去一点(不捅穿就行),电压小一点,就能好一些。祝福楼主!
15楼2014-08-19 17:00:44
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莫伊2013

银虫 (小有名气)

引用回帖:
14楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-08-19 16:58:12
marker一般点个3uL就差不多了,这个胶图跑得还可以啊

我这个是MARK啊 这样总感觉看着不舒服 现在在弄块胶 点个3微升试试
16楼2014-08-19 17:07:08
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beautybanana

木虫 (著名写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by 莫伊2013 at 2014-08-19 16:44:25
还是不行啊,是不是我上样量太多了 我点了5微升。怎么搞的啊,配的TAE应该没问题的

Administrator 2014-08-19 16 时 38 分.jpg
...

marker 你点2ul 就可以了, 5ul 的上样量大了. 电压100V左右就可以, 跑个30-40 min 其实这样的电泳图也可以, 也没有必要追求完美. 你这张图片不是挺好的嘛.
17楼2014-08-19 17:58:24
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莫伊2013

银虫 (小有名气)

引用回帖:
17楼: Originally posted by beautybanana at 2014-08-19 17:58:24
marker 你点2ul 就可以了, 5ul 的上样量大了. 电压100V左右就可以, 跑个30-40 min 其实这样的电泳图也可以, 也没有必要追求完美. 你这张图片不是挺好的嘛....

昨天又试了下 电压调到90V 跑了45min 情况明显好转 下面是图片
PCR电泳总是跑成狗骨头的样子,求大神帮忙找找原因哦-1
Administrator 2014-08-19 19 时 25 分.jpg

18楼2014-08-20 09:19:35
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王程程510

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
莫伊2013: 金币+2, 有帮助 2014-08-20 10:57:20
marker的量不用多,和你跑的DNA的亮度差不多就行,我一般就用2微升,把电压调低,时间延长来跑。另外,选的MARKER要和自己的目的片段长度匹配,100bp长度的如果用2000的marker跑肯定是不合适了,跑出来也不好看。
19楼2014-08-20 10:55:27
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summerliehu

银虫 (小有名气)

分子量小的话肯定容易弥散,建议你调低电压跑跑试一下
★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★欢迎访问【时间管理】版————管理时间,走向成功★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★★
20楼2014-08-20 17:01:30
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