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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 基因组跑胶
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bswhan

铜虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
9楼: Originally posted by nl2016 at 2014-08-16 10:02:57
这个基因组DNA提的挺好的呀，就是样品浓度太高了！
PCR有杂带，建议适当稀释DNA模板后再做PCR!

奥，谢谢你，能留个联系方式吗？初入分子，什么也不懂
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11楼2014-08-16 21:28:18
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bswhan

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by happydove at 2014-08-15 11:15:56
你好！从图上看，点样空位置很干净，你有没有测OD値？
PCR产物有问题，引物用的是以前的吗？
你没有阳性对照，阳性对照PCR结果怎么样？

你没有阳性对照，阳性对照PCR结果怎么样？
这是什么意思，不太懂，PCR我没做过对照
引物我用的是之前的，所以PCR的条件都没有改变过，OD以前测过这次没测
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12楼2014-08-16 21:30:24
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a50044758

银虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by bswhan at 2014-08-16 20:31:47
大侠，可以留个联系方式吗？初入分子，实在不懂，谢谢...

我Q：261496208
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13楼2014-08-17 13:53:51
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小豆子J

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by bswhan at 2014-08-15 10:32:16
菌体老化，我这边用的菌应该30度培养，我37度培养的，12个小时后用的，影响会很大吗？裂解剂我用的自己配的溶菌酶，也是刚配的，问题应该不是很大。我用这次的基因组PCR产物，除了主带，还有好几个条带，之前没有这 ...

37℃培养菌体形态会有变化，对提基因组的影响不太清楚，除了溶菌酶，蛋白酶k一样重要，还有菌体量不要太多，免得裂解不完。PCR有杂带就像楼下说的，模板加少点试试。
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14楼2014-08-21 11:26:26
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bswhan

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by a50044758 at 2014-08-15 15:59:41
一般用的是酚：氯仿：异丙醇为25：24：1（v/v），和提的基因组DNA等体积混合，10000转离心5min，取上清，重复一次，向上清中加入1/10体积的3M pH=5.2的醋酸钠，再加入2.5倍体积纯酒精，-20度冰冻1h，14000r/min冷冻 ...

你好，这个方法可以用来纯化PCR产物吗
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15楼2014-08-29 16:03:02
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a50044758

银虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by bswhan at 2014-08-29 16:03:02
你好，这个方法可以用来纯化PCR产物吗...

可以，只要是DNA都可以！如果有条件的话，最好在用70%酒精沉淀DNA的时候加一点糖原！
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16楼2014-08-30 14:37:55
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小米不爱

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by a50044758 at 2014-08-15 15:59:41
一般用的是酚：氯仿：异丙醇为25：24：1（v/v），和提的基因组DNA等体积混合，10000转离心5min，取上清，重复一次，向上清中加入1/10体积的3M pH=5.2的醋酸钠，再加入2.5倍体积纯酒精，-20度冰冻1h，14000r/min冷冻 ...

请问，酚指的是什么酚？
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17楼2018-04-13 12:08:01
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